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肺鳞状细胞癌组织中磷酯酶CE1的表达

2011-06-20葛晓晴任景丽杨鲲鹏王旭广黄壮士陈培楠王立东

郑州大学学报(医学版) 2011年5期
关键词:酯酶切片免疫组化

葛晓晴,任景丽,杨鲲鹏,王旭广,黄壮士,张 进,陈培楠,谷 博,王立东

1)郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014 2)郑州大学第二附属医院病理科郑州450014 3)河南省食管癌重点开放实验室郑州450052

近年来,肺癌的发病率逐年上升,严重危害人类健康,肺鳞状细胞瘤约占肺癌的50%。最近的研究[1]发现磷酯酶 CE1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)为食管癌的易感基因,而食管癌的病理类型90%以上为鳞状上皮细胞癌。作者采用免疫组化SP法检测肺鳞状细胞癌组织中 PLCE1的表达,并探讨其表达与临床病理特征的关系。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集郑州大学第二附属医院2006年11月至2010年7月手术切除并经病理证实的肺鳞状细胞癌组织48例,患者男44例,女4例,年龄31~77岁,≥60岁27例;按肺癌国际TNM分期标准(第7版),Ⅰ+Ⅱ期20例,Ⅲ期28例;组织学分级G1、G233例,G315例;有淋巴结转移26例;术前均未经任何放疗和化疗。同时选取48例癌旁正常肺组织作为对照。

1.2 PLCE1检测 标本经福尔马林固定后石蜡包埋,连续4 μm厚度切片。切片脱蜡后,于高温pH 9.0 EDTA抗原修复液中修复6 min,自然冷却至室温,以体积分数3%的H2O2阻断内源性过氧化物酶,再经一抗、二抗(均按150倍稀释)作用后,DAB显色并在光镜下控制呈色,苏木素复染后脱水,中性树胶封片。兔抗人PLCE1抗体购自Sigma公司,Envision试剂盒购自DAKO公司。采用已知阳性肺鳞状细胞癌的组织切片作为阳性对照;用PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判定 以细胞核或细胞质棕黄色或棕褐色颗粒状着色为阳性细胞。每张切片随机选取10个高倍视野,计算阳性细胞所占的百分比,≥30%为阳性[2]。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0对数据进行处理,采用配对χ2检验比较正常和癌组织中PLCH阳性表达率的差异,采用χ2检验比较不同人口学与临床病理特征肿瘤组织中PLCE1的阳性表达率,检验水准 α =0.05。

2 结果

2.1 肺癌及正常组织中PLCE1的表达 肺鳞状细胞癌组织中PLCE1的阳性表达率为81.3%(39/48),高于正常肺组织的12.5%(6/48),见表1。

2.2 肺鳞状细胞癌组织中PLCE1的表达与临床病理特征的关系 见表2。

表1 肺正常和癌组织中PLCE1的表达 例

表2 不同人口学与临床病理特征肺鳞状细胞癌组织中PLCE1表达的比较 例(%)

3 讨论

PLCE1 基因位于常染色体 10q23.32-q24.1,其编码蛋白为 PLCE1[3],是 PLC 家族的新成员[2]。PLCE1通过水解4,5-二磷酸(PIP2)产生第二信使肌醇1,4,5-三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)等,参与细胞信号的传导,调控基因表达,调节细胞的生长、分化、细胞凋亡及血管新生[1,4]。在现有的研究中,发现PLCE1可能与化学致癌物诱发的皮肤肿瘤有关[5],可能抑制结肠癌和膀胱癌的发生发展[6-9],与肾病综合征、家族性肾病综合征关系密切[8-9]。

近几年对PLCE1的研究主要与肾病综合征的发生有关[2-6],但对肺癌中PLCE1是否表达国内外暂无此项报道。该研究发现PLCE1在肺鳞状细胞癌组织中的表达明显高于正常肺上皮组织,PLCE1的表达与肺鳞状细胞癌淋巴结转移和肿瘤分期有关,说明PLCE1在肺鳞状细胞癌的发生、发展中起着重要作用,PLCE1的检测可能有助于肺鳞状细胞癌预后的判断。

PLCE1在肺鳞状细胞癌组织中的作用机制尚不十分明确,需进一步探讨,以期为肺鳞状细胞癌的诊断和临床治疗提供新的线索。

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