肺鳞状细胞癌组织中磷酯酶CE1的表达
2011-06-20葛晓晴任景丽杨鲲鹏王旭广黄壮士陈培楠王立东
葛晓晴,任景丽,杨鲲鹏,王旭广,黄壮士,张 进,陈培楠,谷 博,王立东
1)郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014 2)郑州大学第二附属医院病理科郑州450014 3)河南省食管癌重点开放实验室郑州450052
近年来,肺癌的发病率逐年上升,严重危害人类健康,肺鳞状细胞瘤约占肺癌的50%。最近的研究[1]发现磷酯酶 CE1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)为食管癌的易感基因,而食管癌的病理类型90%以上为鳞状上皮细胞癌。作者采用免疫组化SP法检测肺鳞状细胞癌组织中 PLCE1的表达,并探讨其表达与临床病理特征的关系。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集郑州大学第二附属医院2006年11月至2010年7月手术切除并经病理证实的肺鳞状细胞癌组织48例,患者男44例,女4例,年龄31~77岁,≥60岁27例;按肺癌国际TNM分期标准(第7版),Ⅰ+Ⅱ期20例,Ⅲ期28例;组织学分级G1、G233例,G315例;有淋巴结转移26例;术前均未经任何放疗和化疗。同时选取48例癌旁正常肺组织作为对照。
1.2 PLCE1检测 标本经福尔马林固定后石蜡包埋,连续4 μm厚度切片。切片脱蜡后,于高温pH 9.0 EDTA抗原修复液中修复6 min,自然冷却至室温,以体积分数3%的H2O2阻断内源性过氧化物酶,再经一抗、二抗(均按150倍稀释)作用后,DAB显色并在光镜下控制呈色,苏木素复染后脱水,中性树胶封片。兔抗人PLCE1抗体购自Sigma公司,Envision试剂盒购自DAKO公司。采用已知阳性肺鳞状细胞癌的组织切片作为阳性对照;用PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判定 以细胞核或细胞质棕黄色或棕褐色颗粒状着色为阳性细胞。每张切片随机选取10个高倍视野,计算阳性细胞所占的百分比,≥30%为阳性[2]。
1.4 统……
