张书伟，张莉蓉

郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450001

两头毛(incarvillea arguta royle，IAR)为彝医习用药材，别名唢呐花、炮仗花或炮仗筒等。主要分布于甘肃、四川、贵州、云南及西藏等地。来源于紫葳科角蒿属植物毛子草的带根茎全草，具有祛风除湿，消炎止痛和活血散淤的功效［1］，主要用于治疗肝炎、菌痢、痈肿、骨折血肿和风湿劳伤等。研究［2-4］发现自由基具有抗氧化作用，且与许多疾病有关。作者采用D-半乳糖致衰老小鼠模型，应用IAR后测定小鼠心、肝、肾中组织丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和还原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase，GSH)含量的变化，探讨IAR的水提物对衰老小鼠的抗氧化活性及其可能的机制，为IAR的应用提供实验性依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器 MDA、GSH测定试剂盒和SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)，D-半乳糖(上海恒信化学有限公司，批号2009022)，维生素E(浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号20100930)，Sartorius BP 211D型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，TG16-WS高速离心机(南京赛特仪器厂产品)，UV-2409型紫外分光光度计(日本岛津)。

1.2 实验药材及处理 IAR药材购于昆明市金碧路圣爱中医馆。取IAR全草粉碎，过80目筛，用10倍量(大约10 L)的蒸馏水回流提取3 h，再加8倍量(大约8 L)的蒸馏水回流提取3 h，重复一次，合并3次滤液回收，得其水提物。临用时配制成实验所需浓度。

1.3 实验动物分组及给药［5］昆明种小鼠，雄性，体质量(20±2)g，由河南省实验动物中心提供。在21～24℃、相对湿度45% ～55%的环境中适应饲养1周后实验，期间自由饮食和饮水。72只小鼠按照随机数字表分成6组，每组12只，分别为正常组、模型组、阳性药物维生素E组(200 mg/kg)、IAR水提物(IAR-Water)低、中和高剂量组(相当于药材1.9、3.8 和 7.6 g/kg)，给药同时，模型组、阳性药物维生素E组、IAR-Water低、中和高剂量组小鼠每天颈背部皮下注射D-半乳糖1 g/(kg·d)建立衰老小鼠模型，空白组皮下注射等量注射用水，共给药7周。

1.4 小鼠心、肝、肾组织中MDA、GSH和SOD的含量测定 给药7周后处死小鼠，取心、肝、肾组织进行匀浆小鼠心、肝、肾各项指标测定所用测定方法均严格按所购ELISA试剂盒说明书进行。

1.5 统计学处理 采用SPSS 13.0分析数据，各组小鼠心、肝、肾组织中MDA、GSH和SOD含量的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验，检验水准α=0.05。

2 结果

各组小鼠心、肝、肾组织中MDA、GSH和SOD的含量比较见表1。

表1 各组小鼠心、肝、肾组织中MDA、GSH和SOD的含量(n=12)

3 讨论

研究［6］表明，IAR 中含有生物碱、黄酮、神经酰胺和三萜等多种化学成分。用叔丁基氢过氧化物为氧化剂使红细胞氧化，加IAR提取物AB-2后，不仅可使红细胞膜脂质的氧化物减少，还可保护膜蛋白的巯基不致氧化聚合，其作用要优于维生素E。IAR AB-2可防止血红蛋白的自氧化及溶血，用电子自旋捕集法测羟自由基，结果说明AB-2可直接与羟自由基反应，可能是自由基的清除剂。

该研究显示，IAR-Water能使小鼠心、肝、肾中的MDA不同程度下降，提示IAR-Water可抗脂质过氧化;能使小鼠心、肝及肾组织中的SOD和GSH不同程度升高，提示IAR-Water可清除·OH和H2O2。由此可见，IAR-Water可能通过抗脂质过氧化，清除·OH和H2O2自由基而发挥抗氧化作用。

［1］中华本草编委会.中华本草:第3卷［M］.上海:上海科学技术出版社，1999:641

［2］Luo ZY，Tang Y，You JL，et al.Protective effect of anisodamine in cultured bovine pulmonary endothelial cell injury induced by oxygen free radicals［J］.Arch Surg，1992，127(10):1204

［3］Baumgartner-Parzer SM，Wagner L，Pettermann M，et al.High-glucose-triggered apoptosis in cultured endothelial cells［J］.Diabetes，2005，44(11):1323

［4］方允辉，郑荣梁.自由基生物学的理论与应用［M］.北京:科学出版社，2002.

［5］张振明，许爱霞，葛斌，等.太子参水提物的抗氧化活性［J］.中国医院药学杂志，2006，26(2):147

［6］付建军，沈云亨，金慧子，等.两头毛的化学成分及药理作用研究进展［J］.天然产物研究与开发，2007，19(B08):343