刘丽霞 邰浩清 常加松 王长明

南京中医药大学（江苏南京210046）

近年来已从成年大鼠的神经组织中分离培养出多潜能神经干细胞［1］，正常情况下，这些神经干细胞处于“静止”或“休眠”状态，在损伤等特定因素的作用下其分裂、分化的潜能被激活，从而出现增殖现象［2］。本实验以针刺作为干预因素，应用免疫组化染色技术检测巢蛋白（Nestin）、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达，探讨针刺对脊髓损伤后大鼠内源性神经干细胞的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组SD成年雄性大鼠，体质量250～300g，由南京中医药大学试验动物中心提供。一抗Nestin、NSE和GFAP均为兔抗多克隆抗体（武汉博士德生物工程公司生产）；抗兔生物素二抗（南京凯基生产）。

1.2 分组与造模将SD大鼠随机分为假手术组（5只）、模型组（10只）、针刺治疗组（10 只）。 10g/L 戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠，俯卧位固定于手术台上，备皮，常规消毒，无菌条件下纵行切开皮肤皮下组织，分离T9～T11棘突，切除椎板，暴露硬脊膜。假手术组彻底止血后逐层关闭切口；模型和针刺治疗组采用改良Allen’s重物坠击法，用10g自制重锤于2.5cm高度在玻璃导管引导下打击开放的T10段脊髓，出现摆尾反射、双后肢躯体回缩样扑动即为造模成功，彻底止血后逐层缝合肌肉皮肤。各组术后1h予2万U/kg青霉素腹腔注射，每日2次，连续3d。饲养于配有空调的专用室，自由饮食。每日膀胱区按压排尿3次直至排尿反射恢复为止。

1.3 干预方式假手术组和模型组不予干预。……