张 薇,姚 青,王明远,苏小军,熊兴耀

(1湖南农业大学理学院,长沙 410128;2湖南轻工业研究所,长沙 410002;3湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室,长沙 410128)

水稻秸秆木质纤维素经辐照加酶处理转化的糖组成很复杂,已知的成分由木糖、果糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、麦芽糖、纤维二糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等组成。其中糖的种类与含量是将其发酵成燃料乙醇的参考指标[1～6]。目前,有关其糖的测定方法有很多,常用的方法有滴定法、旋光法、薄层法、液相色谱法、气相色谱法、气质联用法、毛细管电泳法、离子色谱法等[7～9]。本文比较了采用液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法、离子色谱法分离测定木糖、果糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、麦芽糖、纤维二糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等组成的混合物。

1 实验材料与仪器

1.1 实验材料

葡萄糖 (AR)、木糖 (GR)、果糖 (AR)、鼠李糖(GR)、半乳糖 (AR)、麦芽糖 (AR)、葡萄糖醛酸 (AR)、半乳糖醛酸(AR)、纤维二糖 (AR)、蔗糖 (AR)、乳糖(AR)等购于天津基准化学试剂有限公司;纤维素酶购于湖南鸿鹰祥生物工程公司;实验所用水都为超纯水。

1.2 实验仪器

离子色谱仪 ICS-3000,美国戴安公司;HP5890气相色谱仪;Agilent HPLC1200液相色谱仪;Beckman P/AGETMMDQ(Beckman公司 )。

2 实验方法

2.1 标准溶液的配制

混合糖溶液 A:精确称取葡萄糖、果糖各 0.0450 g,蔗糖、麦芽糖各 0.0900 g于容量瓶中,用超纯水定容至25 mL,即为 10 mmol/L混合工作对照糖溶液。

混合糖溶液 B:蔗糖、麦芽糖、乳糖各 0.0900 g,葡萄糖0.0450 g于容量瓶中,用超纯水定容至25 mL,即为 10 mmol/L混合工作对照糖溶液。

缓冲液:精密称取吲哚-3-乙酸 0.0175 g,磷酸钠0.0950 g,加入适量超纯水,缓慢滴加 1 mmol/L氢氧化钠,同时搅拌控制 pH值在 11.0以下至吲哚-3-乙酸完全溶解,定容至 50 m L,4℃冰箱备用。……