吕 斌 娄季宇 张 萍 李文杰

1）河南省食品药品检验所 郑州 450003 2）郑州大学第二附属医院 郑州 4500143）郑州市第一人民医院 郑州450002 3）郑州大学公共卫生学院 郑州 450001

本文通过结扎双侧的颈总动脉法，建立慢性脑缺血大鼠模型，观察大鼠脑组织OX1R、OX2R的表达及其随时间变化的情况，探讨其引起改变的意义。

1 材料与方法

1.1 实验动物和主要试剂 SPF级SD大鼠月龄12～14个月，体质量300～350g，雄雌不限，由郑州大学医学院实验动物中心提供。山羊抗多克隆OX1R抗体、OX2R抗体500μg／mL，购自Santa Cruz公司，SP免疫组化试剂盒（山羊）购自北京中山生物试剂公司。其他试剂为进口分装优级纯。

1.2 慢性脑脑缺血大鼠模型建立及实验分组 参照Ohta等［1］方法制作慢性脑缺血大鼠模型。大鼠术前12h禁食，4 h禁水。用1%戊巴比妥钠（10mg／kg）腹腔进行注射麻醉，保证在手术期间有自主呼吸。仰卧固定，颈前部去毛消毒后，沿颈正中切开，分离出双侧颈总动脉，双重丝线给与结扎，术中大鼠肛温保持在36.5℃～37.5℃，手术后动物送至有通风和空调设备的动物房饲养。实验动物随机分为正常组、假手术组、模型组，正常组不予处理常规饲养，假手术组动物仅行颈前切开，不结扎颈总动脉，模型组又分为15d、1个月、2个月共3个亚组，均在相同的时间点处死。每组各12只。

1.3 大鼠的学习记忆能力测试结果 采用水迷宫法，进行大鼠记忆功能的测定。各组大鼠手术前先进行训练。正式训练前先将大鼠放在安全台的附近，让其自行游上安全台2次，然后再分别从中间点、起点各让其自由游上安全台，进行预训练，去除灵活性过差的大鼠，对其余大鼠进行正式训练，直到大鼠连续3次从起点到达终点，游迷宫所需时间差＜10 s，错误次数＜1次，即为训练成功。……