王素军，阮金秀，张振清，张有志，于能江，王桂香，莫李立

(1.广东药学院药科学院药理系，广东广州 510006;2.军事医学科学院毒物药物研究所，北京 100850)

抗抑郁作用经典古方小补心汤由代赭石、旋复花、竹叶和淡豆豉4味中药组成，含有大量的黄酮类化合物。张有志等［1－2］研究结果表明，小补心汤乙醇提取物总黄酮(BX-2)具有良好的抗抑郁活性，且BX-2抗抑郁作用的效价强度比小补心汤明显提高，由于BX-2所含成分多，含量低，目前动物体内物质基础研究无法开展，为了研究其体内效应物质基础，本实验尝试用大鼠原位肠肝循环灌流模型对BX-2的体内效应物质基础进行初步研究。

1 材料与方法

1.1仪器和试剂Agilent 1100 LC/MS，小补心汤总黄酮和13个黄酮单体(军事医学科学院植化室于能江博士提供，HPLC含量＞98%)，甲醇、乙腈(Fisher公司，色谱纯)。

1.2大鼠原位肠-肝血管灌流模型和给药方案参照我们过去建立的模型条件稍加改进［3］，灌流液中含5%牛血清白蛋白。♂性SPF级SD大鼠5只，体质量(200±20)g。BX-2以5%二甲亚砜配制成0.2 g·ml－1，每只大鼠十二指肠给药1 ml，即 0.2 g BX-2/只大鼠。

1.3样品采集与处理与文献报道的方法相同［3］。

1.4分析测定条件Agilent 1100 LC/MS，Intersil C8-3色谱柱(250 mm ×2.1 mm，5 μm)，流动相为5 mmol·L－1甲酸铵水溶液(A)－乙腈(B)，梯度洗脱，乙腈(B)梯度:0～10 min，20% ～25%;10～15 min，25% ～40%;15～20 min，40% ～55%;20～25 min，55% ～20%;25～40 min，20% ～20%。流速 0.2 ml·min－1，质谱检测条件与文献报道相同［3］。

1.5数据处理数据用±s表示，吸收程度=化合物进入灌流液中量/化合物肠道给量×100%。

2 结果

2.1色谱及质谱条件采用选择性离子检测(SIM)，检测离子为负离子，方法的专属性强，灵敏度高，灌流液中杂质不干扰样品的测定，检测离子和色谱保留时间见Tab 1。……