郭秋平，肖百全，杨 威，雷夏凌，黄远铿，张寒冰

(广州医药工业研究院药物非临床评价研究中心，广东广州 510240)

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)指由糖尿病引起心脏微血管病变、心肌代谢紊乱和心肌纤维化等所致的心肌广泛结构异常的一种疾病状态［1］。近年来的研究发现，血管紧张素(Ang-Ⅱ)增多、游离脂肪酸(IFFA)在DCM的发病中起着重要的作用。

格列本脲为目前临床上常用的磺酰脲类口服降糖药，其对DCM的影响报道较少。本研究从电镜及特殊染色等方面观察了格列本脲对GK大鼠心肌的影响，并从Ang-Ⅱ及IFFA等方面，对其作用机制进行了初步探讨。

1 材料与方法

1.1动物分组及处理GK大鼠、Wistar大鼠，♂，体质量220～350 g，上海斯莱克实验动物有限公司。实验动物生产许可证号:SCXK(沪)2007-0005。GK大鼠分为模型组、格列本脲 A、B(2.8、1.4 mg·kg－1)组，正常组选用 Wistar大鼠。每天给药1次，连续12周，末次给药后4 h测定各组大鼠血糖，进行心肌组织电镜检查，并采用PAS、Masson 3色染色观察心肌糖原及胶原纤维的变化，检测血清IFFA及心肌组织Ang-Ⅱ。

1.2药物及主要试剂格列本脲片，天津药物研究所，批号080715。GLUCOCARDⅡ型血糖试纸，ARKRAY Factory Inc，批号:9C5C4S。糖原染色试剂盒，广州市俪科贸易有限公司，批号:20090815。游离脂肪酸(FFA)测定试剂盒:南京建成生物工程研究所。血管紧张素(Ang-Ⅱ)测定试剂盒:大连泛邦化工技术开发有限公司。

1.3主要仪器GT-1640血糖仪:ARKRAY Factory。Leica ASP 300全密封自动脱水机、EG1160石蜡包埋机，德国Leica。Microm HM400平推式切片机，德国MICROM。病理图像分析系统:日本OLYMPUS。ELX800:基因公司。

1.4方法

1.4.1血糖检测给药前、给药12周后末次给药后4 h，采用血糖仪测定每只动物的血糖。

1.4.2电镜检查大鼠麻醉，取左心室心肌，放入3%的戊二醛固定液，PBS漂洗，丙酮梯度脱水，Epon812包埋，超薄切片，铅铀双重染色，透射电镜观察。……