金钗石斛生物总碱对脂多糖激活星形胶质细胞产生炎症因子的影响
2011-06-09张俊青龚其海石京山
张俊青,吴 芹,龚其海,张 锋,金 凤,聂 晶,石京山
(1.遵义医学院药理学教研室,贵州基础药理重点实验室,贵州遵义 563000;2.济宁市精神病防治院,山东 济宁 272051)
炎症反应在阿尔采末病(Alzheimer’s disease,AD)、帕金森病(Parkinson’s disease,PD)、脑缺血和中风(stroke)等中枢神经系统退行变疾病的发病过程中扮演着重要的角色,甚至成为很多原发病发展的主要原因[1]。
星形胶质细胞是中枢神经系统的免疫吞噬细胞,在致炎因素作用下被激活成反应性星形胶质细胞。激活的星形胶质细胞具有吞噬功能,并增加分泌细胞因子如白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor α,TNF-α)及 NO 等,这些物质对神经细胞有毒性作用,使神经细胞凋亡并坏死[2-3]。
脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性菌内毒素的主要成分,研究表明LPS可以诱导星形胶质细胞激活,通过细胞因子TNF-α、IL-6的释放引起炎性反应,从而导致各种病理状态。
石斛(Dendorbium nobile)在我国传统医学中名贵中药材。有研究表明,石斛提取物能明显抑制LPS 诱导的星形胶质细胞分泌 IL-6、TNF-α、NO[4]。本实验室前期研究发现金钗石斛生物总碱对原代培养的大鼠神经元具有保护作用,并发现其在神经药理活性方面具有积极作用[5]。
本课题观察了金钗石斛生物总碱对LPS诱导的大鼠大脑皮层星形胶质细胞的激活,及其产生和释放TNF-α、IL-6的影响及其可能的机制,利用MTS法检测培养的细胞生存率;ELISA法检测TNF-α炎性因子蛋白的表达,通过实时荧光定量PCR(real time RT-PCR)测定TNF-α、IL-6 mRNA水平,进而为金钗石斛的进一步研究提供基础药理学依据。
1 材料
1.1实验动物清洁级(SPF级)Sprague-Dawley(SD)大鼠种鼠25只,购自第三军医大学大坪医院实验动物中心(合格证书号渝SCXK20070005)。……
