方芳 张恒 贾建波 赵玉萍 张海宁 吕华清

生物饲料，即微生物饲料，是在微生态理论指导下采用已知有益的微生物与饲料混合，经发酵、干燥等特殊工艺制成的含活性益生菌的安全、无污染、无残留的优质饲料，与发酵前相比，营养价值提高了，抗营养因子减少了，对动物有一定的促生长作用，可以用来喂猪、鱼、鸭等[1-3]。保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌由于具有调节肠道、促进消化等功能,被众多学者认为是生产益生菌剂的理想菌种。目前对于这三种乳酸菌分别进行固态发酵的研究已有一些报道[4-5]，但对此进行混菌固态发酵的研究还不多见[6]。因此本实验选用玉米粉、麦麸、豆粕这些市场上易购的廉价饲料原料作为固态基质，对这三种乳酸菌进行固态混合发酵，优化固态发酵条件，测定发酵产物的粗蛋白质、粗脂肪和氨基酸态氮含量，为开发一种新型生物饲料打下基础。

1 材料与方法

1.1 菌种

保加利亚乳杆菌 (Lactobacillus Bulgaria,以下简称 LB)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,以下简称LA)和嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles,以下简称ST)由淮阴工学院微生物实验室提供。

1.2 仪器设备

恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、消化炉、定氮仪、分光光度计、索氏提取器等。

1.3 培养基

LB、LA和ST的活化用MRS液体培养基。

固态发酵培养基：①玉米粉：豆粕：麦麸=2：1：1；②玉米粉：豆粕：麦麸=1：2：1；③玉米粉：豆粕：麦麸=1：1：2；④玉米粉：豆粕：麦麸=1：1：1；均添加 5%的葡萄糖、MgSO4·7H2O 0.3 g、MnSO4·4H2O 0.15 g。

LB、LA和ST的活菌数测定采用BBL培养基，参照辛若竹等[7]的测定方法。

1.4 固态发酵培养条件的优化

先对固态基质……