应用改进ELISA检测干血棉球HIV抗体的可行性研究
2011-06-05赵红玉
中国医药科学 2011年21期
赵红玉 李 颖
1.甘肃省灵台县疾病预防控制中心,甘肃灵台 744400;2.甘肃省平凉市第二人民医院,甘肃平凉 744000
目前我国HIV抗体筛查实验室都采用ELISA法检测血清样品中HIV抗体,而血清在常温下存放容易变质;虽然用滤纸干血斑样品便于储存和运输,但因样品载量小(每个滤纸片载体仅容纳50~100 μL血清),其应用范围受到限制。选择何种载体既具有较大的样品载量,以便进行多项目检测,又便于在常温下容易储存和运输;又用何种方法检测这种特殊载体的HIV抗体,这是本研究要探讨的两个问题。医用脱脂棉柔软膨松,吸水性极强,有容易获得,是血清样品的最佳载体。将血清滴于干棉球上制成干血棉球,具有较大的血清容量(每克棉球可吸纳约200~400 μL血清),储存和运输都比较方便,而且样品的前处理也非常容易。为研讨干血棉球代替血清样品检测HIV抗体的可行性,笔者用ELISA法对298份干血棉球与相同血清样品进行了实验对比。为弥补干血棉球处于较高温度、储存较长时间可能会引起HIV抗体阳性样品OD值降低,导致弱阳性出现假阴性结果,本实验又对检测干血棉球HIV抗体的ELISA法进行改进,以提高检测方法的灵敏度。
1 材料与方法
1.1 样品来源
HIV抗体阳性样品来自笔者所在县随访管理的艾滋病患者和HIV感染者及用HIV抗体阴性血清稀释HIV抗体阳性血清制成的弱阳性样品,共100份,其中S/CO比值在1~3的弱阳性样品20份;HIV抗体阴性样品为自愿咨询检测及公共场所从业人员,共198份。
1.1.1 血清样品制备 采集静脉血5 mL,室温放置2 h,自然凝固后3 000 r/min离心15 min分离血清,置-20 ℃保存使用。……
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