张满英,景 影*,李 蕊,毕经瑞,孙连坤,娄长芹

(1.吉化集团公司总医院,吉林吉林市132022;2.吉林大学白求恩医学院 病理生理教研室)

谷氨酸是中枢神经系统兴奋性突触传递的主要神经递质,维持正常脑功能,但较高浓度谷氨酸则具有神经毒性作用[1],中枢神经系统内含有大量兴奋性氨基酸[2],几乎所有的神经元都含有谷氨酸受体,随着分子生物学技术的发展,到目前已克隆出8种mGluRs,分别命名为 mGluR1-mGluR8,mGluR1-3,mGluR5-7的脑保护作用已被证实[3],由于mGluR-4、mGluR-6受体分布的局限性及缺少对不同亚型受体选择性作用的药物,它们与脑损伤及神经保护剂的作用还需进一步证实。

糖尿病是缺血性脑血管病的危险因素,高血糖对缺血性脑卒中的病情和转归有负面影响[4]。目前关于糖尿病脑损伤时代谢型谷氨酸受体及谷氨酸转运体基因表达方面报道较少,本研究着重观察糖尿病脑损伤大鼠代谢型谷氨酸受体、谷氨酸转运体基因的表达情况,探讨他们在脑保护方面的作用。

1 材料和方法

1.1 实验动物分组 清洁级近交系Wistar大鼠28只,雌雄不限,重约160-200 g,购自吉林大学实验动物中心。STZ、戊巴比妥钠购自Sigma公司。鼠随机分成A(常规饲料喂养组,n=14)、B(高糖高脂饲料喂养+STZ注射诱导胰岛素抵抗,即模型组,n=14)二组,自由进食水,12 h光照周期。

1.2 试剂与仪器 PCR扩增仪、PCR热循环仪、DL2000DNA Marker、Taq DNA聚合酶均产自TAKARA公司,日本;RNA定量仪,SANYO,日本;PCR引物合成由联星公司,中国;兔抗大鼠胰岛素多克隆抗体,麦新公司,美国。

1.3 糖尿病大鼠模型的建立

高糖高脂饲料喂养大鼠饲养一个月后,B组大鼠一次性腹腔注射60 mg/kgSTZ(以pH4.2的11 mol/L枸橼酸缓冲液配成125%浓度)诱导糖尿病,A组仅注射枸橼酸缓冲液作对照。……