周卫东，吴 继，王菊勇，王立芳，蔡霄月，徐振晔※

（1．上海中医药大学附属龙华医院肿瘤二科，上海 200032;2．上海中医药大学中医肿瘤研究所，上海 200032）

现代医学早就注意到，肿瘤的生成和发展与人体免疫功能低下、失调有着十分重要的关系。中药增强机体免疫功能是其抗肿瘤的主要机制之一［1］。现代免疫学认为，人体的免疫系统具有免疫监视功能，能监督机体内环境出现的突变细胞及早期肿瘤，并予以清除。因此，肿瘤与机体免疫系统的状态密切相关［2］。随着“治未病，既病防变”思想的不断深入，膏方在肿瘤治疗中的价值也日益受到关注。应用中医膏方治疗肿瘤，是有针对性地将名贵的补益中药与具有抗瘤作用的中药复方相结合，通过提高机体的免疫功能扶正抗癌，起到防复发转移的作用。肺岩宁方为龙华医院肿瘤科徐振晔教授的经验方，主要由生黄芪、白术、蜂房、干蟾皮、黄精、山茱萸、淫羊藿等组成。一方面，研究显示肺岩宁具有明确的抗肿瘤作用［3］;另一方面，研究显示肺岩宁对肿瘤患者有明确的免疫调节功能［4，5］。为进一步探讨其机制，该实验通过建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型，观察以肺岩宁方为基础的膏方制剂对荷瘤鼠抗肿瘤活性及免疫功能的影响。

1 材料与方法

1．1 实验动物与瘤株 C57BL/6小鼠，SPF级，雄性，6～8周龄，体质量18～22 g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，合格证:SCXK（沪）2007-0005。Lewis肺癌种鼠由上海医学工程院药理研究室惠赠。

1．2 药物和试剂 膏方由肺岩宁方加辅料方（鳖甲胶、龟板胶、鹿角胶等组成）按一定比例组成复方，水煎，浓缩，制成膏剂，生药浓度3 g/mL。辅料方水煎，浓缩，制成膏剂，生药浓度2 g/mL。Bouin's液由饱和苦味酸+40%甲醛+冰醋酸配制而成。

1．3 方法

1．3．1 Lewis肺癌自发性肺转移造模 取传代14 d左右的C57BL小鼠，无菌操作，从腋部皮下剥取肿瘤组织，剔除纤维包膜和坏死部分，置组织研磨器中剪碎，加4℃生理盐水轻轻研磨、过滤，制成瘤细胞悬液，调整细胞浓度为1×107/mL。取上述细胞悬液0．2 mL，含细胞数2×106个，接种于 C57BL小鼠右腋部皮下。

1．3．2 分组和给药 造模后随机分为3组，每组11只，分别予膏方、辅料方、生理盐水连续灌胃10 d。

1．3．3 抑瘤率检测 末次给药后24 h，脱颈椎处死小鼠，剥离瘤块，电子天平称重，计算抑瘤率。肿瘤生长抑制率=（1－实验组平均瘤重/模型组平均瘤重）×100%。

1．3．4 肺转移灶检测动物处理同前，取出小鼠完整的肺用Bruin液固定24 h，然后放入无水乙醇漂洗至黄色退出，转移灶呈白色小点，用显微镜观察转移灶数，计数转移率。

1．3．5 对免疫器官的影响 动物处理同前，动物处死后取动物脾脏及胸腺，称重计算脾脏指数和胸腺指数。脏器指数=脏器重量/体质量。

1．4 统计学方法 采用SPSS 13．0统计软件，对于正态分布且方差齐同的采用单因素方差分析（onefactor ANOVA）的单向分类的方差分析（one-way classification ANOVA）进行组间比较。对多个样本均数间的两两比较采用LSD-t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 膏方对Lewis肺癌皮下移植瘤的影响 各组间瘤重无统计学差异（F=0．227，P ＞0．05），膏方组、辅料组对Lewis皮下移植瘤的抑瘤率比较无统计学差异（F=0．227，P ＞0．05）（表 1）。

表1 膏方对Lewis肺癌皮下移植瘤的影响

2．2 膏方对Lewis肺癌转移灶的影响 膏方组与空白组比较，膏方组与辅料组比较，差异均有统计学意义（P ＜0．05）。膏方组影响Lewis肺癌转移灶的作用最强，大于辅料组和空白组（表2）。

表2 膏方对Lew is肺癌转移灶的影响

2．3 膏方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响膏方组和辅料组的体质量分别与空白组体质量比较均有统计学意义（P＜0．05），膏方组体质量与辅料组体质量比较无统计学意义（P＞0．05）。膏方组脾指数分别与空白组和辅料组脾指数比较均有统计学意义（P＜0．05），辅料组脾指数与空白组脾指数比较无统计学意义（P＞0．05）。膏方组胸腺指数分别与空白组和辅料组胸腺指数比较均有统计学意义（P＜0．05），辅料组胸腺指数与空白组胸腺指数比较无统计学意义（P＞0．05）（表3）。

表3 膏方对Lew is肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

3 讨论

膏方在肿瘤治疗中的价值逐渐受到重视。中医膏方个体性强，是根据每一个肿瘤患者的具体情况，针对性、选择性地将一些名贵中药和复方中药组合在一起，再加入辨证与辨病相结合的中药，可以起到相互协调、相得益彰的特殊作用和良好效果。中医认为，肿瘤的形成与“虚”有密切关系，即肿瘤是由于人体正气不足，脏腑功能失调，以致邪毒乘虚而入，蕴聚于经络、脏腑，进而引起机体气血失调、阴阳失衡，导致气滞、血瘀、痰凝、毒聚的病理变化，日久即成肿瘤，是一种全身属虚局部属实的全身疾病。正气虚损，阴阳失调是发生肿瘤的基础。正气不足是肿瘤发生的内在依据，邪毒侵凌是肿瘤发生的外在条件。因此，中医治疗肿瘤可归纳为扶正与祛邪两大方面。膏方具有补中寓治、治中寓补、补治结合的特点。正确应用膏方，不仅能提高机体的免疫功能，纠正和修复手术、放化疗对机体的损坏，而且在体内贮存丰富的营养物质，有助于防复发，抗转移，对防止癌症卷土重来大有裨益。需要一提的是，对肿瘤患者开膏滋药，有别于其他一些由于体质虚弱而行冬令进补的人群，因为肿瘤患者在人体内还存在着不同程度的“邪毒”，所以还应适度加入清热解毒、软坚化痰、理气散结的中药，起到扶正祛邪、祛邪扶正的独特作用。

现代医学认为，肿瘤的生成和发展与人体免疫功能低下、失调关系密切。人体的免疫系统能监督并清除机体内环境出现的突变细胞及早期肿瘤。因此，提高免疫是肿瘤防复发转移的重要环节。这正与中医提倡的“治未病”，通过益气养精，以达到“正气存内，邪不可干”的指导思想相符。

多项研究已显示，本膏方的基础方肺岩宁可以提高晚期非小细胞肺癌患者CD3、CD4及自然杀伤细胞水平，降低调节性T细胞水平，明显改善患者细胞免疫功能，具有明确的抗肿瘤作用［4］。加之辅料中鳖甲、人参等均具有提高机体免疫力的功效，因此，膏方组、辅料组均有不同程度的提高荷瘤小鼠免疫功能的作用。膏方组肺转移发生率的明显下降可能与之通过激活免疫机制，对抗肿瘤的侵袭转移有关。

但该实验中，空白组、辅料组、膏方组各组的瘤重以及抑瘤率没有明显的差异，其原因主要有以下几点:①辅料中的补益药可能降低了组方抗癌的效率，影响了抑瘤作用;②临床服用膏方有一定的指征和禁忌证，一般适用于正虚邪不甚的患者;而C57BL/6小鼠Lewis肺癌的荷瘤模型往往表现为邪甚正不甚虚的证候，小鼠服药后体质量明显增加，活动度较空白组明显增大，毛色较有光泽，可见模型尚无法达到病证结合的要求。综上所述，肺岩宁膏方能够明显提高Lewis肺癌荷瘤小鼠的免疫功能，对Lewis肺癌转移有一定抑制作用，但对Lewis肺癌皮下移植瘤无明显抑制作用。关于中药膏方抗肿瘤治疗的实验研究动物模型的制备，组方结构和量效关系等尚需进一步探讨。

［1］张孜，张瑾峰．中药抗肿瘤作用机制研究进展［J］．中国现代实用医学杂志，2006，5（2）:28-32．

［2］赵峰，刘培勋．中药抗肿瘤及其转移机制研究进展［J］．中国中西医结合杂志，2007，27（2）:178-181．

［3］徐振晔，王中奇，朱晏伟，等．肺岩宁对晚期非小细胞肺癌生长转移和血清VEGF的影响［J］．上海中医药大学学报，2003，17（3）:18-22．

［4］张铭，徐振晔，姜唯洁．肺岩宁方对晚期非小细胞肺癌患者血清调节性T细胞的影响［J］．辽宁中医杂志，2006，33（8）:916-917．

［5］张晖，徐振晔，王中奇，等．肺岩宁方对晚期非小细胞肺癌血清TSGF和免疫功能的影响［J］．辽宁中医杂志，2004，31（6）:518-519．