孙佩龙，郝飞飞，吕淑霞，刘新奇，周建华，林跃智

(1.沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁 沈阳 110161；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001；3.南开大学生命科学学院，天津 300071)

组织细胞受体的表达及其数量是决定病毒侵入途径、扩散方式及引起宿主发病的主要因素，对病毒受体的研究有助于阐明病毒的侵入机制，是病毒性疾病的药物研发及疫苗研制的重要方面[1]。马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus，EIAV)属于反转录病毒科慢病毒属。由于多数EIAV感染马可处于无症状期，并且其携带马可以抵抗其它EIAV株的重复感染，因此EIAV感染马成为慢病毒感染的天然耐受模型，可以为人类免疫缺陷病毒(HIV)及其他慢病毒致病机制及疫苗的研究提供依据[2-4]。

马传染性贫血病毒单一受体(Equine lentivirus receptor-1，ELR1)是目前发现的EIAV的唯一受体。根据序列特征，归属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)蛋白超家族[5]。研究表明，单独转染表达ELR1的细胞就可以介导EIAV病毒的侵入和复制。由此推测巨噬细胞嗜性的EIAV可能仅依赖ELR1侵染靶细胞[5-6]。这与其他慢病毒包括HIV-1不同[7-8]。本实验通过昆虫细胞表达可分泌的ELR1胞外区片段，并获得蛋白结晶体，为应用X-射线衍射技术解析蛋白结构提供了物质基础，同时也为马传染性贫血致病机制的研究奠定基础。

1 材料和方法

1.1 主要实验材料 E.coliTOP10、DH10Bac感受态细胞、真核表达载体pFastBac HG、昆虫细胞株sf9和High Five均由南开大学刘新奇教授惠赠；脂质体Cellfectin购自Invitrogen公司；限制性内切酶NheⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ购自宝生物工程(大连)有限公司；……