Ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白多克隆抗体的制备与鉴定
2011-05-04卢玉婷张海斌柯玉花苗丽娟
饲料博览 2011年6期
王 卓,卢玉婷,魏 雪,张海斌,柯玉花,苗丽娟
(吉林农业科技学院,吉林 吉林 132101)
猪圆环病毒(PCV)是迄今发现的一种最小的动物病毒。现已知PCV有两个血清型,即PCV1和PCV2。PCV1为非致病性的病毒,PCV2为致病性的病毒。PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,并多发于5~16周龄的猪。该病最早发现于加拿大,很快在欧美及亚洲一些国家包括我国发生和流行,除PMWS外,猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、增生性坏死性肺炎(PNP)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦与PCV2感染有重要关联。PCV2及其相关的猪病,死亡率达10%~30%,较严重的猪场在暴发本病时死淘率高达40%,给养猪业造成严重的经济损失。现已被世界各国的兽医与养猪业者公认为是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发现的引起猪攻毒障碍的重要传染病。
本试验利用制备好的原核表达的PCV2 Cap蛋白,免疫Balb/c鼠,制备Ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白的多克隆抗体,根据其抗体产生情况分析其抗体产生规律,生产出的多抗可以作为标准阳性血清用于酶联免疫吸附试验等,且在制备多抗过程中检测出抗体产生的规律,为制备圆环病毒的单克隆免疫程序奠定技术基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
PCV2 Cap蛋白由吉林农业科技学院实验室保存。蒸馏水、弗氏佐剂、PBS为国产试剂。雌性Balb/c鼠购自哈尔滨兽医研究所。
1.2 试验方法
1.2.1 动物免疫试验
将雌性Balb/c鼠6只随机分为对照组和试验组,每组3只。第1次免疫将定量的纯化好的PCV2 Cap蛋白与等体积的完全弗氏佐剂混合并完全乳化后,小鼠腹腔注射0.5mL·只-1;……
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