日粮核黄素添加水平对新扬州仔鸡免疫功能的影响

2011-04-28蚌埠学院生物与食品工程系汪张贵闫利萍

中国饲料 2011年13期

蚌埠学院生物与食品工程系汪张贵闫利萍

扬州大学动物科学与技术学院王志跃* 龚道清杨海民

近年来，随着我国养殖业的飞速发展，核黄素缺乏症的发病率越来越高，造成危害日益严重。核黄素缺乏症是一种群发性代谢病，发病率高，死亡率高低不等。根据动物免疫系统发育的规律，调整动物特别是幼龄动物的核黄素营养素需要量，提高动物的抗病力和抗应激力，使动物处于最佳的生产性能和免疫状态是切实可行的。但目前有关核黄素与畜禽免疫功能相关的研究存在很多不足，导致饲养生产实际对核黄素的科学应用存在一定的盲目性。为此，本试验以0～8周龄新扬州鸡为试验对象，探讨日粮中核黄素添加水平对其免疫功能的影响，为实际生产中科学有效地使用核黄素提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验设计与日粮组成选用288只1日龄体重相近的健康新扬州雏鸡，随机分成4组，每组设3个重复。试验鸡日粮中分别添加0（Ⅰ）、3.6（Ⅱ）、7.2（Ⅲ）、14.4 mg/kg（Ⅳ）4 个水平核黄素（饲料级，净含量80%）。分0～4周龄和5～8周龄两阶段饲养。试验日粮组成及营养水平见表1。

1.2 饲养管理试验鸡分三层平养，常规饲养。自由采食和饮水。1日龄皮下注射马立克HVT弱毒苗0.20 mL；7日龄鸡新城疫Ⅳ系苗，点眼滴鼻各1滴进行首免，14日龄复免一次。

1.3 测定指标与方法分别在 14、21、28、35、42、49日龄和56日龄从各重复中随机抽取公母鸡各1只进行采样，先进行宰前空腹称重，无菌采血，1 mL抗凝血供用白细胞总数和淋巴细胞计数，2 mL离心分离血清测定抗体水平，然后进行屠宰试验。

1.3.1 免疫器官重量宰杀后剖摘胸腺、脾脏和法氏囊，用滤纸吸去血，剔除脂肪后称重。

1.3.2 白细胞总数计数采用禽类专用Ⅰ和Ⅱ液混合染色，显微镜下计数（叶应妩，1997；史言，1989）。

1.3.3 淋巴细胞计数采用Wright-Giemsa混合染色法进行白细胞分类计数：取抗凝血1滴，于干净载玻片上推片，自然干燥，用Wright-Giemsa混合染色法染色（刘志浩和宗英，2002；叶应妩，1997），计数200个白细胞，计算出淋巴细胞占白细胞总数的百分比。

1.3.4 新城疫抗体效价的测定采用常规的血凝和血凝抑制试验测定。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 数据处理用SPSS 12.0软件进行单因子方差分析。若差异显著再用LSD法进行均数间多重比较，试验结果以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 日粮核黄素添加水平对家禽免疫器官重量的影响由表2可知，在0～56日龄内，新扬州鸡的胸腺、脾脏和法氏囊三者重量均随日粮核黄素添加量增加呈现递增趋势，但核黄素的影响效果各不相同。与对照组相比35、49日龄和56日龄时，试验Ⅳ组新扬州鸡胸腺重量差异显著（P﹤0.05）；21、35、42 日龄和 49 日龄时新扬州鸡脾脏重量差异显著（P﹤0.05），28日龄和56日龄时差异均极显著（P﹤0.01）。21日龄时试验Ⅲ组新扬州鸡脾脏重量与对照组相比差异显著（P﹤0.05）；35日龄时，试验Ⅳ组新扬州鸡法氏囊重量与对照组相比差异显著（P﹤0.05），而14日龄时试验Ⅳ组新扬州鸡法氏囊重量与对照组相比差异极显著（P﹤0.01），其他处理组间差异均不显著（P＞0.05）。

表2 日粮核黄素添加水平对新扬州鸡胸腺、脾脏和法氏囊重量的影响 g

2.2 日粮核黄素添加水平对家禽白细胞和淋巴细胞数量的影响由表3可知，在0～56日龄内，新扬州仔鸡外周血液白细胞总数、淋巴细胞总数及其百分比均随核黄素添加量增加呈递增趋势，但各处理组间差异均不显著（P＞0.05）。这表明日粮中核黄素能促进仔鸡血液白细胞生成，且在一定程度上呈剂量依赖性关系。

2.3 日粮核黄素添加水平对家禽新城疫抗体效价的影响由表4可知，在0～35日龄内，随着日龄增长和核黄素添加量增多，血清新城疫疫苗抗体水平提高。试验Ⅳ组与对照组相比，49日龄时血清中新城疫抗体水平差异显著（P＜0.05），而在 14、21、28、35、42 日龄和 56 日龄时差异均极显著（P ＜ 0.01）；试验Ⅲ组与对照组相比，14、21、28、35、42日龄和56日龄时差异显著（P＜0.05）；试验Ⅳ与Ⅱ相比，在14、21、35日龄和56日龄时新城疫抗体水平差异显著（P＜0.05），而28日龄时差异极显著（P＜0.01），其他处理组间差异均不显著（P ＞ 0.05）。

表3 日粮核黄素添加水平对新扬州鸡白细胞总数和淋巴细胞数的影响

表4 日粮核黄素水平对新扬州仔鸡血清新城疫抗体水平的影响 log2

3 讨论

3.1 日粮核黄素添加水平对家禽免疫器官重量的影响免疫器官重量增加是其自身细胞生长发育和分裂所致。免疫器官重量增加意味着免疫系统成熟较快，机体免疫功能较强；胸腺、脾脏和法氏囊发育状态在一定程度上反映禽类全身免疫水平的高低。张建海等（2003）研究发现，添加不同水平核黄素能够刺激49日龄仔鸡脾脏和法氏囊发育，且脾脏相对重量明显增加。本试验研究结果也表明，日粮核黄素添加量对0～56日龄新扬州鸡的胸腺、脾脏和法氏囊发育均有不同程度促进作用。这可能是由于核黄素作为许多酶的辅助因子参与机体碳水化合物、蛋白质和脂肪代谢，促进家禽包括胸腺、脾脏和法氏囊在内各种器官发育的缘故。但是，王丹莉等（2003）报道，日粮中添加核黄素对热应激下42日龄和56日龄肉仔鸡的胸腺、脾脏和法氏囊3种免疫器官相对重量影响均不显著（P＞0.05）。这可能是高温抑制免疫器官发育、变性和坏死或高温加速体内核黄素代谢及排泄速度，从而影响免疫器官发育的缘故。

3.2 日粮核黄素添加水平对家禽白细胞和淋巴细胞数量的影响张建海等（2003）报道，核黄素能提高肉仔鸡外周血液白细胞和异嗜细胞数量，但对白细胞总数影响不显著（P＞0.05）。本次试验研究结果也表明，日粮核黄素水平能够增加新扬州仔鸡外周血液白细胞总数、淋巴细胞数量及百分比，但各处理组间差异均不显著（P＞0.05）。这可能是核黄素作为许多酶的辅助因子参与机体碳水化合物、蛋白质和脂肪代谢，为细胞生成提供了大量物质基础，促进血液白细胞和各类白细胞生成的缘故。

3.3 日粮核黄素水平对新城疫抗体水平的影响新城疫抗体水平是反映鸡新城疫免疫状况的指标，也是反映机体特异性体液免疫功能的指标。王丹莉等（2003）报道，添加 5.2、12.4、23、35 mg/kg和48 mg/kg核黄素可显著提高热应激下肉仔鸡56日龄血清新城疫抗体水平（P＜0.05）。本研究试验结果也表明，添加核黄素能提高新扬州仔鸡血清新城疫抗体水平，特别是7.2 mg/kg和14.4 mg/kg核黄素显著或极显著影响抗体水平，且能使抗体水平维持相当长的时间。研究表明，核黄素能促进胸腺和法氏囊发育，而胸腺和法氏囊是家禽产生新城疫特异抗体的主要器官（Alam等，1997），因而日粮添加核黄素能够提高新扬州仔鸡新城疫抗体水平。