液相色谱法测定饲料添加剂L-肉碱盐酸盐
2011-04-28上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所赵志辉
上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所 林 淼 赵志辉
左旋肉碱(L-carnitine)具有提高养殖动物的免疫力、抗应激能力,改善肉品质,提高存活率等作用(周键鸿和刘冬生,1996)。它常以盐酸盐的形式存在,即L-肉碱盐酸盐(左旋肉碱盐酸盐)。我国在1999年7月26日,由农业部发布的《允许使用的饲料添加剂品种目录》中,L-肉碱盐酸盐被列入其中。目前国家标准检测方法是采用非水滴定法。以冰乙酸为溶剂,结晶紫为指示剂,高氯酸为标准溶液滴定L-肉碱盐酸盐结构中的碱性氮(饲料添加剂 左旋肉碱 NY/T1028-2006)。此方法的优点是方法简便,容易操作,成本较低,然而存在的缺点是无法排除其他含有碱性氮结构的物质(如甜菜碱、氯化胆碱等饲料添加剂)干扰。由于L-肉碱盐酸盐具有紫外吸收基团,在210 nm处有最大吸收峰,同时在酸性流动相中与庚烷磺酸钠能够结合形成疏水性离子对,可经反相色谱分离(赵榕等,2004)。因此本实验中建立反相液相色谱法测定L-肉碱盐酸盐。
1 实验部分
1.1 方法原理 饲料添加剂中L-肉碱盐酸盐用二次蒸馏水超声提取。在酸性流动相中与试剂庚烷磺酸钠结合形成疏水性离子对,经反相色谱分离。
1.2 试剂与材料
1.2.1 试剂 甲醇:色谱纯;流动相:称取3.4 g磷酸二氢钾溶液(0.05 mol/L)及0.20 g庚烷磺酸钠(0.002 mol/L)溶于500 mL水中,用磷酸调pH=2.5,甲醇(色谱纯)含量为5%。
除特殊说明,所用试剂均为分析纯。实验用水为超纯水。
1.2.2 L-肉碱盐酸盐标准溶液 准确称取L-肉碱盐酸盐标准品(Sigma公司提供)0.0200 g,用二次蒸馏水溶解并定容于10.0 mL,此溶液含L-肉碱盐酸盐为2.0 mg/mL。……
