陈瑾歆 李云祥 王安果 张宗平 川北医学院生物化学教研室(南充 637000)

慢性前列腺炎(Chronic prostatitis,CP)疼痛是其最主要的症状,因对其痛因至今尚无满意的解释,治疗相当棘手 ,严重影响着患者的生活质量。西医改善疼痛症状效果不明显,中成药常有较好的疗效,前列舒通胶囊(保定步长天浩制药有限公司,国药准字 Z20027140)能较好改善 CP的临床症状 ,中药治疗 CP分子机制尚不明确,本文采用不同剂量前列舒通治疗慢性前列腺炎症大鼠,检测模型大鼠脊髓背角中 CGRP的表达的表达,探讨前列舒通治疗慢性前列腺炎的分子机制。

1 材料和方法 1.1主要试剂和仪器 RN A抽提纯化试剂盒 ,TaKaRa Ex Taq HS酶,RT试剂盒 ,DNaseⅠ (大连宝生物生物技术有限公司),实时定量检测扩增仪 (Bio-RAD,USA)。

1.2 动物模型的分组和制备 3月龄雄性 SD大鼠 40只,完全随机选取 8只为正常对照组 ,其余 32只为实验组,实验组在大鼠前列腺侧叶注射完全弗氏佐剂 20μL制备慢性前列腺炎动物模型,正常对照组注射等量生理盐水,术后 20d实验组大鼠完全随机分为炎症组、前列舒通治疗高、中、低剂量组(n=8),每组大鼠经灌胃给药,前列舒通高、中、低剂量组给药剂量为 0.84g/kg、0.42g/kg、0.21g/kg,1次 /d。正常对照组、炎症组给予相应体积蒸馏水。

给药第 30天于末次给药 24h后处死,纵行剖开椎管显露脊髓,在解剖显微镜下取出 L5-S2脊髓背角组织备用。同时取前列腺组织作 HE染色观察组织的水肿、血管密度、白细胞数量和作甲苯胺蓝染色观察组织的肥大细胞密度鉴定前列腺炎症。

1.3 cDN A第一链的合成 将 1.2取出的脊髓背角组织抽提总 RNA,加入 DNaseⅠ处理总 RNA去除基因组 DNA,取约1.5 μg总 RNA为模板合成 cDNA,-20℃储存备用。……