西安交通大学医学院第一附属医院

郭少贤 刘永惠 常 靖△ 夏欣欣 王 瑞 华 莎 （西安 710061）

肿瘤的增殖、转移,与肿瘤微环境有十分重要的关系,对肿瘤微环境的研究已成为目前研究的热点之一,而肿瘤细胞持续缺氧可以诱导新生血管生成,可能为肿瘤增殖、转移提供一定的环境与条件。现代中医研究认为,肿瘤及其转移存在血瘀证,与肿瘤增殖、转移存在正相关关系。为深入研究血瘀证与肿瘤微环境及肿瘤的增殖、转移的关系,本实验应用麝香酮干预血瘀证裸鼠乳腺癌组织血管生成相关因子 VEGF、bFGF的表达,探讨麝香酮对肿瘤微环境的影响,进一步阐述其抗肿瘤增殖、转移的作用机理。

1 材料与方法

1.1 动物与细胞系 雌性裸鼠40只,体重 （20±2）g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号码SCXK（沪）2007-0005,饲养于动物实验室 SPF环境中。乳腺癌MDA231细胞株购自北京康为世纪生物科技有限公司。

1.2 药物 麝香酮购自德国Dr（批号 90527CY）,肾上腺素购自上海禾丰制药有限公司 （批号 H 31021062）。

1.3 仪器与试剂 SCW-BCM生物超净工作台系苏州市长春电子仪器厂生产;台式多功能离心机系长沙市鑫奥仪器仪表有限公司生产;普通光学显微镜购自日本 Olympus公司;电热恒温水浴箱 DR-HW-2购自北京西城区医疗器械厂;CO2细胞培养箱购自上海控菱科技有限公司;VEGF一抗及bFGF一抗购自北京康为世纪生物科技有限公司;VEGF二抗及bFGF二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.4方法

1.4.1 细胞培养:乳腺癌 MDA 231细胞株用含 10%胎牛血清的 RMPI1640培养液培养,细胞长满单层后用 0.25%胰酶消化,培养液吹打离心,收集细胞用 PBS稀释,浓度调至 5×106。……