HPLC-ELSD法测定黄芪汤颗粒剂中黄芪甲苷的含量

2011-04-25张钰泉李风华

长春中医药大学学报 2011年6期

关键词：方法

王爽,张钰泉，张幸，李风华

(上海中医药大学科学技术实验中心,上海 201203)

黄芪汤颗粒剂由黄芪、生甘草等中药组成，具有补气生津的功效，能不同程度的干预大鼠胆汁瘀积性肝硬化形成[1]。黄芪是黄芪汤颗粒剂的君药，为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch)Beg.var.mongholicus(Beg.)Hisao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch)Beg.var.mongholicus(Beg.)的干燥根。药理研究表明黄芪具有心肌保护[2]、降血糖[3]、抗肝纤维化[4]等作用。黄芪甲苷(astragaloside IV)是黄芪中的主要化学有效成分，因此，选择测定黄芪甲苷(astragaloside IV)的含量来评价黄芪汤颗粒剂的质量。目前，黄芪甲苷的含量测定方法主要有荧光分光光度法[5]、薄层扫描法[6-7]、柱前衍生高效液相色谱法[8]、HPLC-MS/MS法[9-10]等。因为荧光法要求样品纯度高，薄层扫描法重现性差，高效液相色谱法在紫外区仅有末端吸收且干扰较多，衍生化高效液相色谱法处理样品过程复杂，质谱法专一性较强，但成本过高。本实验采用HPLC-ELSD法，灵敏度高，重现性好，用于没有紫外吸收的黄芪甲苷的含量测定，结果满意。

1 仪器与试样

Agilent 1100液相色谱仪(美国Agilent公司)，Varian 380-LC型蒸发光散射检测器(美国Varian公司)，Agilent 1100化学工作站。

黄芪甲苷对照品(购自中国药品生物制品检定所，批号:110781-200613)，甲醇(色谱纯，Merck公司，批号I568307048),正丁醇(分析醇，国药集团化学试剂有限公司，批号T20100305),氨水(分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号T20090902)，水为重蒸水(自制)，黄芪汤颗粒剂(自制)。

2 色谱条件

色谱柱：Thermo Hypersil-Keystone ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相:甲醇-水(65∶35)；流速：1.0 mL/min；柱温：50 ℃；进样量：20 μL；氮气输出压力为0.5 MPa；ELSD参数：Evap 90 ℃,Neb 50 ℃,Gas 1.6 mL/min。