(河南省人民医院，郑州450003)

RCAS1是Sonoda等［1］在1996年新发现的一种 蛋白质，在子宫癌、卵巢癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中异常表达，并与肿瘤的分化、侵袭和恶性程度相关。Caspase家族的蛋白酶解级联反应控制着细胞凋亡的发生发展，是细胞凋亡的中心环节和执行者。Caspase-8广泛表达于各种成人组织，其中在血液淋巴细胞中表达尤为丰富［2］。研究发现，Caspase-8的低表达与人类多种恶性肿瘤的发生、发展以及肿瘤的免疫逃逸有关［3］。但二者在胃癌组织中的表达情况尚未见报道。本研究采用免疫组化SP法检测RCAS1、Caspase-8在胃腺癌组织中的表达，探讨其表达与胃癌发生发展的关系，为进一步寻求胃癌等恶性肿瘤的发生机制奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料 选取河南省人民医院和郑州大学第一附属医院2007年1～12月手术切除的胃腺癌组织46例，其中男26例，女20例，年龄33～81岁，患者术前均未接受化疗和放疗，均经常规病理证实。另选取手术切缘经病理证实为正常胃黏膜组织46例作为对照。全部标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，以备常规HE染色和免疫组化使用。

1.2 主要试剂 羊抗人RCAS1单克隆抗体由美国Zymed公司提供;兔抗人Caspase-8多克隆抗体由美国Scbt公司提供;免疫组化SP检测试剂盒及DAB显色试剂盒均由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。

1.3 免疫组化 参照免疫组化SP试剂盒说明书进行操作。主要操作步骤为:5 μm石蜡连续切片，二甲苯脱蜡，梯度酒精水化，10%蛋清封闭，滴加一抗(RCAS1抗体稀释浓度为1∶200，Caspase-8多克隆抗体为即用型)，1%H2O2封闭内源性过氧酶，滴加二抗及链霉亲和素—过氧化物酶复合物，DAB-H2O2溶液显色，苏木素复染。……