于海英，刘 畅，高凤兰，孙中华

(1漯河医学高等专科学校，河南漯河462002;2吉林大学第一临床医院)

胃癌的预后差，病死率高，探讨胃癌的生物学特性是目前研究热点［1］。肿瘤新生血管形成和细胞外基质降解是其浸润和转移的重要环节。黏附分子CD44拼接变异体v6(CD44v6)主要见于具有转移能力的肿瘤细胞，且参与淋巴细胞活化、增殖及再循环［2］。2010年2～10月，我们采用免疫组化方法检测80例胃癌组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、CD44v6和血管内皮生长因子(VEGF)，探讨其在胃癌发生发展的作用。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 本组80例胃癌标本均来源于我校附属医院2007年1月～2010年5月手术治疗的胃癌患者。80例患者中，男48例，女32例;年龄34～76(56.1±11.2)岁。均经病理证实且随访资料完整，术前均未行放化疗以及其他抗肿瘤治疗。TNM分期:Ⅰ期10例、Ⅱ期29例、Ⅲ期23例、Ⅳ期18例;有淋巴结转移52例，无淋巴结转移28例。每例标本均取癌组织及其对应的正常癌旁组织，均用10%甲醛固定，石蜡包埋。

1.2 主要试剂及MMP-9、CD44v6、VEGF检测方法 鼠抗人MMP-9和CD44v6单克隆抗体、兔抗人VEGF多克隆抗体、免疫组化SP试剂盒、DAB显色剂和中性树胶等(均购自福州迈新公司)。所有标本均采用免疫组化SP法染色，操作及结果判定参照试剂盒说明书。用已知MMP-9、CD44v6和VEGF阳性表达的乳腺癌组织切片为阳性对照，PBS替代一抗为阴性对照。细胞膜或胞质内出现棕黄色颗粒为MMP-9、CD44v6、VEGF染色阳性。每一切片在高倍镜下(×200)随机计算8～10个视野，按阳性细胞数占肿瘤细胞总数的百分比判定结果:MMP-9和CD44v6:阳性细胞＜10%为阴性(－)、≥10%为阳性(+);VEGF:阳性细胞 ＜10%为 －、10% ～49%为弱阳性、≥50%为强阳性，后两者为+。……