林 昀，龚士学，程辉跃

（重庆市药品检验所，重庆 401121）

醋酸甲萘氢醌又名维生素K4，是维生素类药，主要适用于肠道吸收不良及各种原因所致阻塞性黄疸、慢性溃疡性结肠炎等肠道吸收功能减低等造成维生素K缺乏的凝血障碍性疾病。现行标准中，醋酸甲萘氢醌片的含量测定方法为紫外分光光度法[1－3]。笔者按质量标准方法验证指导原则[1]，建立了测定醋酸甲萘氢醌片含量的反相高效液相色谱法，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent1100型高效液相色谱仪（配有紫外检测器和二极管阵列检测器）；AgilentC18柱（250mm×4.6mm，5μm），AichromBond－AQC18柱（250mm×4.6mm，5μm），WelchMaterialsC18柱（150mm× 4.6mm，5μm）；AE 240型电子天平（瑞士梅特勒）。醋酸甲萘氢醌对照品（中国药品生物制品检定所，批号为0228－9802）；样品（3个厂家共6批，均为市售品）；乙腈为色谱纯，水为二次蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件选择

2.1.1 测定波长选择

取醋酸甲萘氢醌对照品约10 mg，用适量流动相溶解并稀释成每1 mL中含0.02 mg的溶液，照紫外－可见分光光度法[2005年版《中国药典（二部）》附录ⅣA]，在230～400 nm波长范围内扫描（图1）。结果285 nm波长处有最大吸收，故以此为测定波长。

图1 醋酸甲萘氢醌紫外扫描图谱

2.1.2 流动相选择

由于国内外药典均未收载该品种的高效液相测定方法。笔者经考察和筛选，最终决定以乙腈－水（65∶35）为流动相，柱温为室温，检测波长285 nm，流速1.0mL/min，进样量20μL。在此色谱条件下，被测物质峰与相邻杂质峰分离度良好，保留时间适中，峰纯度因子为999.0，色谱图见图2 C。

图2 高效液相色谱图

2.1.3 空白辅料影响及破坏性试验

称取按处方量配制的空白辅料（相当于1片的量），加流动相约100mL，置37℃水浴中，超声处理10min，放冷，滤过，作为空白辅料溶液。……