汤丽霞,欧丽群,曾劲伟,梁彩红,禤洁甜,林 蔚,陈华锦,杨 光

(广东省佛山市第一人民医院临床研究所 528000)

人类血红蛋白由两对珠蛋白链构成。在个体发育不同阶段,胚胎阶段、胎儿阶段和成人阶段,不同的α和β珠蛋白基因簇的开放与关闭控制着人体珠蛋白表型的变化。成人阶段主要表达血红蛋白A(HbA)和少量的血红蛋白A2(HbA2)。而胎儿阶段以胎儿血红蛋白(HbF)表达为主,HbA仅有少量。血红蛋白在人体发育各阶段都有正常参考值,抗碱法新生儿的HbF的正常参考值为55%～85%[1],但未见相应高效液相色谱法(HPLC)和抗碱法在妊娠中晚期检测胎儿脐带血HbF浓度的正常参考值。本文使用HPLC和抗碱法检测产前诊断中晚期妊娠胎儿脐带血HbF浓度,计算相应正常参考值范围,并应用于产前诊断抽取脐血过程中母血污染脐血的筛查。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2006年7月至2007年12月在本院进行中晚期妊娠产前诊断的孕妇抽取脐带血共116例,男性胎儿56例,女性胎儿60例。2008年1月至2010年 6月使用 HPLC检测脐带血 HbF相对含量220例,男性胎儿 119例,女性胎儿101例。

1.2 染色体核型分析 肝素钠抗凝管脐带血0.3 mL加入拜迪生产的外周血淋巴细胞培养基5 mL内,37℃培养70 h,加入秋水仙素终浓度0.04～0.08 μ g/mL继续培养 2 h,常规低渗、固定、制片、G显带程序操作,计数 20个核型,LEICA CD4000系统分析大于等于5个核型。

1.3 抗碱法HbF定量检测 方法见文献[1]。

1.4 HbF定量检测 HPLC采用美国Bio-Rad公司生产的Hb自动分析仪-VARIANTTMⅡ(β-thalassemia Short Program)及厂家提供的配套试剂。每次进行 HPLC分析时先测定厂家配套的高低两个浓度的质控品,室内质控合格才进行研究对象标本HbF的分析测定。……