李 深， 任 哲，， 王巧利， 向阳飞， 王一飞△，胡巢凤， 戚仁斌， 陆大祥△， 张庶民， 张佩琢

(暨南大学1生物医药研究开发基地，2医学院病理生理学系，广东广州510632; 3中国药品生物制品检定所，北京100050;4上海吉玛制药技术有限公司，上海201203)

单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus 1，HSV－1)是一种双链DNA病毒，可引起口唇疱疹和疱疹型角膜结膜炎、单纯疱疹病毒性脑炎等许多感染性疾病［1］。病毒感染后可长期潜伏于人体的中枢神经系统，反复发作，给病人造成极大的痛苦与困扰［2］。虽然临床上抗HSV病毒药物种类繁多，但多为核苷类似物，毒副作用大，且存在停药后易反弹、易产生耐药突变株、不能完全抑制和清除潜伏的病毒等缺点。因此，寻找新的抗病毒治疗策略，已成为当今HSV感染后治疗的研究热点［3］。US12基因表达的立即早期蛋白ICP47所针对的是主要组织相容性复合体－I(major histocompatibility complexⅠ，MHC－Ⅰ)抗原呈递过程中决定抗原呈递效率的重要蛋白之一抗原肽转运蛋白(transporter of antigen peptides，TAP)。ICP47可以削弱TAP的肽转运功能，导致抗原递呈细胞表面MHC－I的表达量显著下降，直接干扰了MHC－I途径对细胞毒T细胞的激活，使感染的细胞逃脱了宿主的免疫清除，在病毒感染中起着重要作用［4］。

RNA干扰(RNAi)是一种古老的生物抗病毒机制，是由双链RNA(dsRNA)介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象，它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达［5］。RNAi技术已经广泛应用于抗SARS、HIV、HBV病毒等的研究中，RNAi对RNA病毒或逆转录病毒能通过发挥降解病毒基因组及降解靶基因表达的mRNA产生双重抑制作用［6－9］。本实验以HSV－1病毒US12基因为研究对象，筛选有效沉默的siRNA，体外研究其对HSV－1感染的作用，为进一步应用RNAi技术在抗病毒方面的研究奠定基础。……