张茹 秦莉伟 陈军丽 许宏斌

骨质疏松(osteoporosis)是由于骨量减少，骨的微观结构退化，致使骨的脆性增加，并且易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病。中药治疗、预防骨质疏松是目前临床治疗的重要手段之一。复方补骨脂方剂为我院多年协定处方，对改善骨质疏松患者的症状取得了明显疗效［1-3］。本实验观察了复方补骨脂颗粒对维甲酸致骨质疏松大鼠的影响，为临床使用该颗粒剂提供客观理论依据。

1 材料与方法

1.1 药物与仪器 复方补骨脂颗粒(石家庄市第三医院，批号:060215);仙灵骨葆胶囊(贵州同济堂制药有限公司，批号: 040711，规格0.5g/粒);钙测试盒、磷测试盒、碱性磷酸酶测试盒(均为南京建成生物工程研究所产品);维甲酸原料(上海南翔试剂有限公司);仪器:5000型火焰原子吸收分光光度计(美国)、自动生化分析仪。

1.2 实验动物 SD大鼠(二级)，雄性，体重200～220 g，由河北省实验动物中心提供，许可证号为SCXK(冀)2003-1-003。

1.3 实验方法 将大鼠随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组(纯化水1 ml/100 g)、模型对照组(维甲酸70 mg/kg +纯化水1 ml/100 g)、复方补骨脂颗粒小剂量组(维甲酸70 mg/kg+复方补骨脂颗粒0.35 g/kg)、复方补骨脂颗粒中剂量组(维甲酸70 mg/kg+复方补骨脂颗粒0.7 g/kg)，复方补骨脂颗粒大剂量组(维甲酸 70 mg/kg+复方补骨脂颗粒

1.4 g/kg)及阳性药仙灵骨堡胶囊组(维甲酸70 mg/kg+仙灵骨葆胶囊0.7 g/kg)，连续2周。2周后6组大鼠均停服维甲酸，继续给药2周。末次给药后40 min，将大鼠用乙醚麻醉，腹主动脉取血，分离血清，采用化学法测定血清钙、磷含量，碱性磷酸酶(ALP)活性;处死大鼠，剖取睾丸、前列腺+精囊腺称重，计算脏器系数;迅速小心剖取左侧股骨，并钝性剥离所有软组织，将左侧股骨以氯仿∶甲醇混合液(2∶1)脱脂72 h，置烘箱中120℃干燥6 h，在将干骨置800℃马福炉内灰化6 h，冷却后称重。取灰分精密称定适量，加6 mol/L稀盐酸溶解成无色透明液体，定容10 ml，使用火焰原子吸收分光光度计测定骨钙含量，采用钼兰法测定骨钙含量。

1.4 统计学分析 计量资料以 ¯x±s表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对骨质疏松大鼠体重及一般情况的影响 模型对照组大鼠活动缓慢，反应迟钝，倦缩，拱背，竖毛，毛色枯槁，食量减少，体重明显减轻(P＜0.01)。复方补骨脂颗粒(0.35 g/kg、0.7 g/kg、1.4 g/kg)组大鼠一般状况明显较模型对照组大鼠改善，体重明显增加(P＜0.01)。见表1。

表1 复方补骨脂颗粒对骨质疏松大鼠体重的影响n=10，g，±s

表1 复方补骨脂颗粒对骨质疏松大鼠体重的影响n=10，g，±s

注:与模型对照组比较，*P＜0.01

组别 剂量(g/kg)体重(g)实验前 实验后正常对照组 - 216±9 265±16*模型对照组 - 218±17 209±14复方补骨脂颗粒 0.35 211±9 232±13* 0.7 215±14 249±14* 1.4 207±12 248±13*仙灵骨葆胶囊 0.7 213±15 241±18*

2.2 对骨质疏松大鼠股骨骨灰重的影响 模型对照组大鼠骨灰重明显较正常对照组大鼠降低(P＜0.01)。复方补骨脂颗粒(0.35 g/kg、0.7 g/kg、1.4 g/kg)组大鼠骨灰重均较模型对照组大鼠明显增高(P＜0.05或＜0.01)。见表2。

表2 复方补骨脂颗粒对骨质疏松症大鼠骨灰重的影响n=10，g，±s

表2 复方补骨脂颗粒对骨质疏松症大鼠骨灰重的影响n=10，g，±s

注:与模型对照组比较，*P＜0.05，#P＜0.01

组别 剂量(g/kg)灰重正常对照组 - 0.352±0.029#模型对照组 - 0.207±0.026复方补骨脂颗粒 0.35 0.251±0.048* 0.7 0.268±0.026# 1.4 0.287±0.042#仙灵骨葆胶囊 0.7 0.304±0.039#

2.3 复方补骨脂颗粒对大鼠骨钙、磷含量的影响 模型对照组大鼠骨钙含量明显较正常对照组大鼠降低(P＜0.01)。复方补骨脂颗粒(0.35 g/kg、0.7 g/kg、1.4 g/kg)组大鼠骨钙含量明显较模型对照组大鼠升高(P＜0.01)，但6组大鼠骨磷差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表3 复方补骨脂颗粒对骨质疏松大鼠骨钙、磷含量的影响n=10，ng/g，±s

表3 复方补骨脂颗粒对骨质疏松大鼠骨钙、磷含量的影响n=10，ng/g，±s

注:与模型对照组比较，*P＜0.01

组别 剂量(g/kg)钙含量 磷含量正常对照组 - 202±14*133±12模型对照组 - 168±9 124±12复方补骨脂颗粒 0.35 189±11* 130±9 0.7 189±8* 137±17 1.4 183±14* 129±9仙灵骨葆胶囊 0.7 197±8*131±8

2.4 对骨质疏松大鼠性腺指数的影响 模型对照组大鼠睾丸指数、前列腺+精囊指数均较正常对照组显著降低(P＜ 0.01)，表明大鼠灌服维甲酸已造成性腺器官萎缩。复方补骨脂颗粒(0.35 g/kg、0.7 g/kg、1.4 g/kg)组大鼠睾丸指数、前列腺+精囊腺指数显著高于模型对照组(P＜0.05或＜0.01)。见表4。

表4 复方补骨脂颗粒对骨质疏松大鼠性腺器官重量的影响n=10，±s

表4 复方补骨脂颗粒对骨质疏松大鼠性腺器官重量的影响n=10，±s

注:与模型对照组比较，*P＜0.05，#P＜0.01

组别 剂量(g/kg)睾丸指数(g/100 g)前列腺+精囊指数(g/100 g)正常对照组 - 1.240±0.169# 0.434±0.056#模型对照组 - 0.818±0.172 0.269±0.085复方补骨脂颗粒 0.35 1.051±0.199* 0.348±0.042* 0.7 0.994±0.0843# 0.330±0.067* 1.4 0.957±0.133 0.345±0.086*仙灵骨葆胶囊 0.7 1.154±0.189#0.326±0.075

2.5 对骨质疏松大鼠血液生化指标变化 6组大鼠血钙、血磷含量无明显变化(P＞0.05)，但碱性磷酸酶(ALP)活性较正常对照组明显升高(P＜0.01)，复方补骨脂颗粒(0.35 g/kg、0.7 g/kg、1.4 g/kg)组大鼠碱性磷酸酶(ALP)活性均明显较模型对照组降低(P＜0.05或＜0.01)。见表5。

表5 对骨质疏松大鼠血液生化指标的影响 n=10，±s

表5 对骨质疏松大鼠血液生化指标的影响 n=10，±s

注:与模型对照组比较，*P＜0.05，#P＜0.01

组别 剂量(g/kg)血钙含量(mmol/L)血磷含量(mg/dl)碱性磷酸酶(U/dl)正常对照组 - 2.61±0.23 5.6±0.7 9.1±2.4#模型对照组 - 2.20±0.24 4.5±0.7 15.9±4.3复方补骨脂颗粒 0.35 2.49±0.41 5.0±0.7 12.6±4.4 0.7 2.50±0.30 5.2±1.3 10.1±3.2# 1.4 2.81±0.33 5.3±0.9 10.8±3.6#仙灵骨葆胶囊 0.7 2.53±0.29 5.3±0.7 11.4±3.0*

3 讨论

骨质疏松症是一种全身性代谢性骨骼疾病，以骨量减少，骨的微细结构破坏为特征，导致骨脆性增加，容易发生骨折，其发病率和死亡率都较高。骨质疏松症可分为原发性和继发性两类，其中原发性骨质疏松症占骨质疏松症的90%［4］。它又可分为2种亚型，即Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型又称绝经后骨质疏松症，Ⅱ型为老年性骨质疏松症。继发性骨质疏松症可继发于其他疾病或由药物引起。中医把骨质疏松症归属“骨痿、骨枯、骨痹”范畴，认为其发病机理为肾虚及脾虚，故针对病机而采用补肾壮骨、益气健脾的治疗法则。治疗骨质疏松的中药尽管在临床上显示了良好的疗效，但需要进行大量系统的试验研究工作，如临床前药理、毒理试验，动物脱毒试验等。

本实验结果表明:复方补骨脂颗粒可明显改善维甲酸致骨质疏松大鼠的一般状况，减缓体重的减轻和性腺器官的萎缩，降低血清碱性磷酸酶活性，增加骨质疏松大鼠骨灰重及骨钙含量。研究结果为临床用药提供了必要的理论依据。

1 吴波，徐冰，黄添友，等.抗骨松冲剂对维甲酸所致大鼠骨质疏松的防治作用.中国中西医结合杂志，1996，16:32-36.

2 陈奇主编.中药药理实验方法学.第1版.北京:人民卫生出版社，1996.217.

3 徐叔云主编.药理实验方法学.第2版.北京:人民卫生出版社，1991.136.

4 白新明.椎体成形术治疗老年骨质疏松性椎体压缩骨折体会.河北医药，2010，32:1928-1929.