张艳侠，刘丹花，角灿武，付润芳，程亮星

(1.郑州大学基础医学院药理学教研室，河南 郑州 450001;2.国际眼科杂志社，陕西西安 710054;3.濮阳市人民医院药剂科，河南濮阳 457000)

随着冠脉搭桥术、溶栓疗法以及心脏外科体外循环术等方法在临床工作中的广泛开展，MIRI成为亟待解决的问题。PGE1具有扩张外周血管和冠状血管，降低外周阻力和血压，保护缺血性心肌，缩小心肌梗死面积等作用［1］。以往研究［2－4］已经从多方面证实PGE1对心肌具有保护作用，而对PGE1预处理在离体大鼠MIRI中PKC所介导的信号转导机制及其与HSP70之间的联系，尚未见报道。本实验通过测定PKC和HSP70的表达，以探讨PKC信号转导通路在PGE1预处理对大鼠MIRI的保护作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物与试剂 SD大鼠，♂♀各半，体质量(300±50)g(河南省实验动物中心提供)。前列腺素E1粉针剂(南阳普康药业有限公司，批号:200802201)。小鼠抗PKC抗体(武汉博士德生物工程有限公司)。兔抗HSP70抗体(北京博奥森生物技术有限公司)。SP免疫组化染色试剂盒(美国ZYMED公司)。

1.1.2 主要仪器 Langendorff灌流装置(自制);电泳转膜仪，美国Bio-rad公司;倒置显微镜，日本Nikon公司;多媒体彩色图像分析软件，上海山富科学仪器有限公司。

1.1.3 实验分组 40只大鼠随机分成5组:正常对照组(C组)，缺血/再灌注组(I/R组)，PGE114，42，126 μg·L－1预处理组，每组 8 只。

1.2 方法

1.2.1 大鼠离体心脏缺血/再灌注模型的制备200 mg·L－1乌拉坦(5 ml·kg－1)ip 麻醉大鼠，肝素500 IU抗凝。迅速开胸取心，置于4℃无钙台式液，经主动脉逆行插管，一号丝线结扎，挂于Langendorff装置上，灌流20 min，灌流液为正常台式液，其组成为(mmol·L－1):NaCl 140，KCl 5.4，HEPES 10，MgCl21，CaCl22，Glucose 10，pH=7.4 with NaOH，待心率＞200次·min－1，灌流正常台式液或含PGE1的正常台式液30 min，停灌30 min，再用正常台式液灌流30 min。……