李新娟，李 爽，李东亮

(新乡医学院生理学与神经生物学教研室，河南新乡 453003)

缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是导致新生儿死亡及神经系统后遗症的主要原因，此病的治疗尚无长足进步，目前仍以综合支持治疗为主［1］。近年来研究发现孕酮(progesterone，PROG)除调节生殖功能外，还可作用于中枢神经系统［2－3］。PROG 对脑缺氧缺血的保护作用，也引起人们的极大关注［4］。本课题前期研究发现，PROG预处理可提高缺氧缺血(hypoxic-ischemic，HI)新生大鼠脑组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性［5］。本实验通过观察PROG对HI新生大鼠血脑屏障(blood brain barrier，BBB)通透性、脑含水量和脑皮质水孔通道蛋白4(aquaporins-4，AQP4)表达的影响，来探讨PROG脑保护作用的可能机制，为更好预防与治疗新生儿HIE提供理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂PROG(Sigma公司)，伊文思蓝(evans blue，EB，Serva公司)，兔抗鼠 AQP4 多克隆抗体、SABC免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程公司)。

1.2 动物分组与给药方法7 d Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，♂♀不限，体质量11～16 g，由新乡医学院实验动物中心提供，随机分成4组:正常组、假手术组、HI组和PROG组。各组随机分为3个亚组(n=8)，分别用于BBB通透性、脑含水量的测定和免疫组织化学法观察AQP4的表达。PROG组于建模型前30 min按8 mg·kg－1腹腔注射PROG芝麻油液，其余各组注射等容积芝麻油。

1.3 动物模型的制备［6］新生大鼠经乙醚麻醉后，背位固定于手术台，体积分数为0.75乙醇消毒，颈部正中切开皮肤，分离皮下肌肉，于胸锁乳突肌内侧深部分离右颈总动脉，并于近端和远端结扎右颈总动脉，在中间剪断，消毒缝合，立即将动物置于37℃，80 ml·L－1氧气和 920 ml·L－1氮气的低氧箱内2 h，而后继续母乳喂养。……