何金花，陈顺仪，王 莉，陈武嘉，黄俊杰，蒋建伟

(1.广东省广州市番禺中心医院检验科，广东 广州 511400;2.暨南大学医学院生化教研室，广东 广州 510630)

研究表明，消化系肿瘤的发病与肿瘤细胞凋亡的减少有密切关系。通过诱导肿瘤细胞使其重新恢复凋亡，比杀死肿瘤细胞更符合人体生理性细胞死亡过程，可以明显减少或消除当前治疗药物所导致的毒副作用。因此，诱导肿瘤细胞凋亡已成为肿瘤研究的一个热点。凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis proteins，IAPs)编码一组结构相关的蛋白质，能抑制Caspase依赖的细胞凋亡途径。在人类发现的 IAPs家族有8个成员，其中 survivin、xiap、BRUCE/apollon、livin是其中的主要成员，抑制细胞凋亡作用较强［1］。因此人们提出IAPs家族基因可能是肿瘤治疗的分子靶点。

目前有一些靶向采用 survivin、xiap、apollon、livin基因的反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide，ASO)或siRNA抑制肿瘤细胞增殖的实验文章，但是，在IAPs家族的这些基因中反义抑制哪个基因的表达效果更好呢，尚未见这方面的实验报道。为此本文拟采用 survivin、xiap、apollon、livin反义核酸作用于人肝癌、结肠癌、胃癌细胞，比较它们对细胞的增殖与凋亡的作用，为消化系肿瘤基因治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1.1 主要试剂及细胞 DMEM/F12培养基购自Gibco公司，脂质体 LipofectamineTM2000、Annexin VPI双染试剂盒购自美国BD公司，CCK-8(Cell Count Kit-8)试剂购自日本同仁化学研究所。人肝癌HepG2细胞、胃癌 MGC-803细胞、结肠癌Lovo细胞由本实验室提供。

1.1.2 反义核酸 4条IAP家族各成员反义核酸序列均是文献［2－5］已经证实能高效特异性抑制靶基因表达，由赛百盛生物工程技术服务有限公司合成，全硫代修饰，PAGE纯化，冻存于－20℃，使用前用无血清的DMEM/F12培养液配制成100 μmol·L－1的浓度备用。……