冯瑞军

(新疆轻工职业技术学院， 新疆 乌鲁木齐 830021)

0 引 言

酶催化反应的选择性有很好的实用价值，近年来日益受到人们的重视.近年来对酶的选择性的研究主要集中在立体选择性及对映体的拆分上[1,2]，而对水解中酶的位置选择性和脂肪酸类型选择性的研究鲜有报道.本文所用脂肪酶Lipase LVK来源于黑曲霉，文献对其专一性的报道并不一致.另外，脂肪酶Lipase F-AP15是一种sn-1,3位选择性脂肪酶，其选择性水平有待研究.本文对脂肪酶Lipase LVK、Lipase AY 30G 以及Lipase F-AP15的位置选择性、脂肪酸选择性进行了研究测试.

1 材料和方法

1.1 主要原料及试剂

脂肪酶Lipase LVK(粗酶粉，深圳市绿微康生物工程有限公司)，来源于黑曲霉，活力为25 000 U/g.

Lipase AY 30G (Amano Enzyme INC NAGOYA, Japan,天野公司惠赠)，来源于假丝酵母，活力为30 000 U/g.

Lipase F-AP15 (Amano Enzyme INC NAGOYA, Japan，天野公司惠赠)，来源于根霉，其活力为150 000 U/g.

红花油，产地：伊犁，碘值[4]：146.2 mg/g，其脂肪酸含量气质色谱分析结果见表1.

表1 红花油中脂肪酸含量分析

0.1 mol/L氢氧化钾/乙醇标准溶液，0.5 mol/L氢氧化钾/乙醇标准溶液.

0.1 mol/L硫代硫酸钠标准溶液，0.1 mol/L氯化碘冰醋酸标准溶液重铬酸钾(基准物)，薄层层析硅胶G.

1.2 仪器及设备

ZD-8802型摇床(太仓市科教器材厂)；Orion 828型酸度计(美国奥立龙).高速组织捣碎机；微量注射器.

1.3 分离及检测方法

1.3.1 水解产物中脂肪酸与混合酯的分离方法

向洗去酶粉后的水解产物中加入酚酞指示剂，加入0.5 mol/L KOH/乙醇至溶液呈深红色, KOH优先与脂肪酸(FFA)形成水溶性皂[3],加入适量水﹑正己烷及适量乙醇，溶液中脂肪酸皂与混合酯分离；上层溶液蒸去正己烷后得到混合酯；下层溶液(脂肪酸皂……