李瑞明 ，陈 孝 ，林生文 ， 隆 颖 ，曹 媛 ，吴敏江

1.中山大学附属第一医院，广东广州 510080；2.广东省药品检验所，广东广州 510180

丹墨胶囊由墨旱莲、女贞子和丹参等药材组成，具有滋阴补肾、活血祛瘀的功效，主要用于治疗以肾虚为主的慢性肾炎，治疗效果显著[1]。为了更好地控制药品质量，保证产品疗效，参照文献[2-7]，笔者对处方中的主要药材墨旱莲、女贞子和丹参进行了薄层色谱鉴别，结果重现性好，专属性强，现报道如下：

1 仪器与试药

硅胶G薄层板（Merck板）；墨旱莲对照药材（批号：958-9302），女贞子对照药材（批号：1041-9701），丹参对照药材（批号：120923-200610）， 丹酚酸B对照品（批号：110562-200807）均由中国药品生物制品检定所提供；供试品（批号：101001、101002、101003）由中山大学附属第一医院提供；所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 墨旱莲的薄层色谱鉴别

2.1.1 供试品溶液的制备 取本品10粒（5 g），研细，加70%甲醇25 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2 对照药材溶液的制备 取墨旱莲对照药材0.1 g，同“2.1.1”项方法制成对照药材溶液。

2.1.3 阴性对照溶液制备 按处方中药味比例，同丹墨胶囊制造方法制成墨旱莲阴性对照样品，取相当于供试品的量，再按“2.1.1”项方法制成墨旱莲阴性对照溶液。

2.1.4 方法 照薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液10 μl、对照品溶液1 μl，阴性对照溶液10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（图1，见封三）。

2.2 女贞子的薄层色谱鉴别

2.2.1 供试品溶液的制备 取本品10粒（5 g），研细，加乙醚30 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。

2.2.2 对照药材溶液的制备 取女贞子对照药材0.5 g，同“2.2.1”项方法制成对照药材溶液。

2.2.3 阴性对照溶液制备 按处方中药味比例，同丹墨胶囊制造方法制成女贞子阴性对照样品，取相当于供试品的量，再按“2.2.1”项方法制成女贞子阴性对照溶液。

2.2.4 方法 照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20 μl、对照药材溶液5 μl、阴性对照溶液20 μl分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（40∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点（图2，见封三）。

2.3 丹参的薄层色谱鉴别

2.3.1 供试品溶液的制备 取本品5粒（2.5 g），研细，加70%甲醇30 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。

2.3.2 对照药材溶液的制备 取丹参对照药材0.5 g，同“2.3.1”项方法制成对照药材溶液。

2.3.3 对照品溶液 取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3.4 阴性对照溶液制备 按处方中药味比例，按丹墨胶囊制造方法制成丹参阴性对照样品，取相当于供试品的量，再按“2.3.1”项方法制成丹参阴性对照溶液。

2.3.5 方法 照薄层色谱法试验，分别吸取供试品溶液1 μl、对照药材溶液 1 μl、阴性对照溶液 1 μl、对照品溶液 2 μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）或紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（图3，见封三）。

3 讨论

墨旱莲、女贞子和丹参为丹墨胶囊中的主要成分，在成品中对其进行鉴别可控制药品质量。丹墨胶囊中墨旱莲药材鉴别时，以墨旱莲对照药材为对照，以正己烷-乙酸乙酯（10∶1）为展开剂，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；丹墨胶囊中女贞子药材鉴别时，以女贞子对照药材为对照，齐墩果酸对照品确认对应斑点，以三氯甲烷-甲醇（40∶1）为展开剂，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，但齐墩果酸对照品色谱相应位置上样品斑点太弱，故未将齐墩果酸对照品纳入标准中，而直接采用女贞子对照药材鉴别；丹墨胶囊中丹参药材鉴别时，以丹参对照药材为对照，丹酚酸B对照品确认对应斑点，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶1∶1）为展开剂，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品斑点相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。三种药材鉴别结果色谱斑点清晰，分离理想，重复性好，且阴性对照无干扰。在4℃、18℃、25℃三种温度和32%、68%、72%三种相对湿度下进行温度及湿度影响因素考查，结果显示温度和湿度的变化对于墨旱莲、丹参和女贞子的薄层色谱分析无影响，在不同的温度和湿度下均取得了较好的分离效果。综合分析，本试验方法灵敏，专属性强，结果准确，操作简便，可作为丹墨胶囊的质量控制方法。

[1]阳晓,叶任高,刘冠贤,等.38年中西医结合治疗肾脏病的临床和实验研究[J].中山医科大学学报,2000,21(6)：401-408.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：中国医药科技出版社,2010：附录 VIB.

[3]赵晓春,郭惠娟.更年灵胶囊质量标准研究[J].中国药品标准,2004,5(4)：42-44.

[4]范晓庆,杨钊,张春辉.海青胶囊中黄芪、大黄、丹参的薄层色谱鉴别[J].药物鉴定,2008,17(8)：42.

[5]麦少霞.更年滋肾口服液的薄层鉴别[J].中药材,2009,32(8)：1313-1314.

[6]余琰,黄燕,魏舒畅,等.二至胶囊质量标准研究[J].药物分析杂志,2010,30(2)：291-293.

[7]张小红.复方降脂胶囊质量标准研究[J].今日药学,2010,1(20)：31-33.