王 轶,刘珊珊,黄 瑾

(中山大学附属第五医院1.ICU;2.呼吸科,广东 珠海519000)

本研究以红霉素为代表,探讨金黄色葡萄球菌在不同药物浓度下耐药产生的比率及何浓度下更容易诱导耐药,并探讨对红霉素高度耐药的菌株是否有遗传稳定性,及对其他种类的抗生素有无交叉耐药,以期对临床医生用药给予一定的指导。

1 材料与方法

1.1 受试菌株 标本为从我院临床呼吸道标本中分离出的对红霉素敏感(MIC≤0.5 μ g/ml)的菌株4株,来自晨起痰标本、纤维支气管镜吸取痰标本、支气管肺泡灌洗液。标准菌株ATCC 29213来自卫生部临床检验中心。菌株均经过革兰氏染色及美国BD公司生产的Phoenix100全自动微生物鉴定仪通过鉴定/药敏复合板鉴定及测定MIC值,试验前再次采用NCCLS M-27A方案,用琼脂稀释法对试验菌株进行药敏试验[1]。

1.2 诱导方法 含红霉素的药物琼脂平皿从四分之一MIC(0.125 μ g/ml)开始,以 2倍连续稀释浓度配制,把临床分离的菌株与标准菌株在不同药物浓度含药平皿中各接种5-10代,每株菌株同时设空白对照组,于每个药物浓度传代后测MIC值的变化[2],以 8 μ g/ml≤MIC ≤16 μ g/ml为低度 耐药 ,16 μ g/ml≤MIC ≤64 μ g/ml为中度耐药 ,MIC ≥256 μ g/ml为高度耐药。成功诱导后,再测定耐药突变株的遗传稳定性及对其他种类抗生素包括青霉素类、头孢类、氨基糖甙类、喹诺酮类等有无交叉耐药。

2 结果

4株敏感菌株及1株标准菌株在不同浓度梯度的培养皿中多次传代后,获得了抗不同浓度红霉素的耐药突变菌株。5株菌株最后的MIC值分别为2株 MIC ≥256 μ g/ml,2 株 4 μ g/ml＜MIC ＜8 μ g/ml,1株16 μ g/ml＜MIC ＜32 μ g/ml。同时做空白对照的只在空白培养皿中的5株菌株的MIC值分别为3株2 μ g/ml＜MIC ＜4 μ g/ml,1 株 1 μ g/ml＜MIC ＜2 μ g/ml,1株 0.5 μ g/ml＜MIC ＜1 μ g/ml。……