宋骏，夏长胜

(1.皖南医学院附属弋矶山医院检验科，安徽芜湖241001;2.北京大学人民医院检验科，北京100044)

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)为嗜肝双链DNA病毒，是最重要的肝脏疾病致病因子。根据乙型肝炎病毒(HBV)全基因组序列差异≥8%或S基因序列≥4%，将HBV分为A、B、C、D、E、F、G、H等8个基因型[1，2]，同时据全基因序列异质性≥4%而≤8%将HBV同一种基因型再分为不同的亚型[3]，如:A基因型可分为Aa和Ae亚型;B基因型可分为B1(Bj)、B2(Ba)、B3和B4亚型;C基因型可分为C1、C2、C3和C4亚型等。

据报道HBV基因型或亚型的分布呈一定的地理区域性[4]。因此，分析不同地区基因型或亚型的分布，使用分子流行病学方法研究其流行势态对乙肝的防治具有重要意义。

皖南地区是以汉族为主的民族聚居地，有关HBV感染的基因型及亚型研究鲜有报道。本研究拟对皖南地区HBV感染者进行基因型和亚型的检测，以期了解HBV基因型的地区分布特点及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象皖南医学院附属弋矶山医院就诊的319例HBV感染患者被纳入研究，其中急性乙型肝炎10例，慢性乙型肝炎231例，肝硬化43例，肝细胞癌8例，以及无症状携带者27例。所有患者血清HBV DNA检测为阳性。选择患者来我院就诊的首次HBV DNA阳性血清标本进行基因型及亚型检测。

1.2 主要试剂核酸提取试剂购自Promega公司;PCR试剂购自宝生工程(大连)有限公司。

1.3 血清DNA提取严格按照说明书的操作进行。

1.4 引物设计参考文献[5，6]，引物序列见表1所示;引物由北京三博远志生物技术有限公司合成。

表1 HBV型特异性引物分型法的引物序列

1.5 HBV基因型检测HBV基因分型采用多对引物和巢式PCR法。……