朱 闽，覃兆伟，荀建宁，梁永协，周 凯

广西中医学院附属瑞康医院男性科，广西南宁 530011

良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）多见于老年人，发病率随着年龄的增加而呈上升趋势[1]。迄今为止BPH的发病机制尚未完全明了，但总是细胞增殖和细胞凋亡共同作用的结果。笔者为探讨固本补肾汤治疗BPH的作用机制，进行了体外人前列腺基质细胞的培养，用四氮唑蓝法（MTT）检测药物对体外培养人前列腺基质细胞增殖的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 标本来源 本次研究细胞培养用的前列腺组织块取自经耻骨上前列腺摘除术切除的前列腺标本，每分标本重量2～3 g，经组织学证实为BPH组织。

1.1.2 主要实验试剂 1640培养液（美国Glbco公司），DMEM培养液（美国Glbco公司），胎牛血清（美国Gibco公司），马血清（美国 Gibco公司），MTT（美国 Sigma公司），二甲基亚砜（美国Sigma公司），逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）试剂盒TakaPa RNA PCR Kit(Amv)Ver3.0（武汉博士德生物有限公司），Trizol核酸提取液（美国sigma公司）。

1.1.3 主要实验仪器 CO2恒温培养箱（TC2323型，美国Sheloln），超净工作台（苏州真田洁净设备有限公司），相差倒置显微镜（ECLIPSETE300型，日本Nikon公司），96孔培养板，25 cm2培养瓶（日本Nuco公司产品），PCR基因扩增仪（TC-48/T/H（a）杭州大和株式会社），电泳仪（杭州大和株式会社），DU640核酸/蛋白分析仪（美国 BECKMAN COULTER）。

1.2 实验药物

固本补肾汤方药：黄芪15 g、党参10 g、枸杞子12 g、丹参15 g、当归12 g、肉苁蓉10 g、王不留行15 g等。按剂量以农本方（香港培力南宁药业有限公司提供，每一味中药浓缩剂均已独立取得国家正式生产批文）溶于Hank's中，用细胞培养液稀释至1 g/ml，1 500 r/min，离心5 min去除沉淀，用0.22 μm微孔滤膜滤过除菌，4℃保存备用。枸橼酸他莫昔芬片：由上海华联制药有限公司生产（国药准字H10910072），10 mg/片，用Hank's液溶解，用细胞培养液稀释配制成1 ng/ml，制备方法同前。……