王 李，刘长剑，罗宗键

(1.大连市友谊医院 医学影像科，辽宁 大连 116001；2.大连医科大学 附属第一医院 骨科，辽宁 大连 116011；3.长春中医药大学附属医院 骨科，吉林 长春 130021)

现已知多种理化因素能参与影响体内、外成骨过程的各个环节。各种因素在此过程中并非只是单独调节骨形成或骨吸收，而是对骨吸收和骨形成在不同的组织。不同的时间段起不同的作用，经综合、交叉作用后共同完成对成骨的调节。体外冲击波(extracorporeal shock wave,ESW)对成骨细胞的作用引人注目。ESW可以一种机械能的形式进入骨折部位，骨组织对高频率、低强度的机械刺激敏感。而低能量的ESW正好可持续给予骨折部位的骨组织这种应力刺激。大量研究证明，频率、能量强度适合的ESW可促进骨愈合[1,2]。成骨细胞的体内环境中，由于液体流动、活体运动等因素，也是处于持续的应力刺激之下。有文献报道，PKC和p38MAPK蛋白激酶家族成员可能与成骨细胞增殖、成骨功能密切相关[3,4]。所以，本研究观察ESW这一应力刺激因素对体外培养鼠成骨细胞(ROB)增殖分化的影响，并进一步探讨了ESW作用的细胞内信号传导过程中PKC和p38MAPK的可能作用。

1 材料和方法

1．1 实验材料

动物和试剂：出生24 h内Wistar大鼠乳鼠(大连医科大学实验动物中心，雌雄不拘，清洁级)72只，每次取6只颅盖骨成骨细胞分瓶培养、扩增至第3代备用。PI染液、RNA酶(北京鼎国生物技术公司)，ALP活性检测试剂盒(南京建成公司)，兔抗鼠I型胶原免疫组化试剂盒(武汉博士德公司)，高糖DMEM培养基(美国Hyclone公司)，胎牛血清(杭……