余阗 卿茂盛 肖伟

类风湿性关节炎是一种慢性自身免疫性的炎症性关节病，其病理基础为关节滑膜炎，后期致滑膜增厚，骨与软骨组织受损。类风湿性关节炎(RA)的关节软骨和骨组织损害，与滑膜细胞的过度增生活化与凋亡不足密切相关[1]。研究表明，RA患者滑膜组织和成纤维样滑膜细胞中Fas／FasL减少或突变、细胞因子和Bcl-2表达增加、p53突变等，从而导致炎症细胞及滑膜细胞凋亡不足，表现为抑制凋亡和诱导凋亡免疫稳态失衡的病理改变[2]。

桂枝芍药知母汤始见于张仲景《金匮要略·中风历节病脉证并治第五》，历代医家均将其作为治疗痹证的主方在临床广泛应用。本研究试图探讨桂枝芍药知母汤对RA大鼠滑膜细胞增殖、凋亡的影响及对细胞凋亡调控基因的影响。

1 材料与方法

1.1 体内动物实验

1.1.1 动物造模与分组 选取清洁级Wistar大鼠30只，体重50～100g，用0.1mmol/L醋酸溶解Ⅱ型胶原蛋白(2mg/mL，4℃，过夜)，再与等量的弗氏完全佐剂混合，于冰浴中充分乳化，除正常组外，每只大鼠尾根部皮下多点注射胶原蛋白0.2mg。造模后10d将动物随机分为正常组、对照组和治疗组各10只。

1.1.2 桂枝芍药知母汤方药 桂枝，白芍，炙甘草，麻黄，知母，白术，炮附子，生姜。

1.1.3 实验方法

1.1.3.1 动物灌胃药物及取材 将桂枝芍药知母汤按常规方法煎煮浓缩成含生药1kg/L，4℃保存备用。造模后第10天治疗组大鼠灌服桂枝芍药知母汤制剂11g/(kg·d)，正常组灌服生理盐水，每日一次；对照组每6天予灌服一次MTX混悬液5mg/kg。连续饲养36d，均断头处死。取膝关节滑膜组织，一部分用福尔马林固定、包埋、切片，留待原位细胞凋亡检测；……