张 勇,石 铭,綦盛麟

(大连市第六人民医院,辽宁大连 116031)

乙肝病毒携带者病毒基因分型与C基因启动子及前C区变异的相关性分析

张 勇,石 铭,綦盛麟

(大连市第六人民医院,辽宁大连 116031)

为探讨乙型肝炎病毒基因分型与C基因启动子(CP)及前C区变异(PC)的相关性,我们对89例乙型肝炎病毒携带者进行病毒基因分型,观察其间的相关性。

1 材料与方法

1.1 研究对象 我院门诊及住院乙肝病毒携带者89例,用ABI7500基因荧光定量对其进行病毒含量、基因分型、C基因启动子(CP)及前C区变异(PC)检测,取其外周血用《KL型免疫图像分析仪》测其T淋巴细胞Ag-NORs活性,肝组织穿刺标本进行常规病理切片。

1.2 研究方法

1.2.1 乙肝病毒基因分型及C基因启动子及前C区变异检测 100 μ l待检血清样本模板提取严格按照提取试剂盒操作说明书操作;HBV DNA提取模板加入PCR扩增反应体系,反应条件:反应管先在50℃保温5 min,然后94℃保温5 min,再按 93℃30 s→60℃90 s循环40次;置ABI 7500全自动定量PCR仪上进行病毒基因分型及C基因启动子及前C区变异检测分析。

表1 引物设计:C基因启动子前C区

1.2.2 肝组织病理检测 穿刺标本至少在镜下包括3个以上汇管区,标本连续切片,苏木精伊红(HE)染色,镜下观察肝内炎症、组织结构改变及纤维化程度。

表2 炎症活动度(G)与纤维化程度(S)分级标准[1]

1.2.3 T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)活性检测 采用《KL型免疫图像分析仪》测其T淋巴细胞Ag-NORs活性,结果以IS%表示。

1.3 数据统计处理 结果经SPSS10.0统计软件处理。

2 结果

2.1 不同病毒基因分型患者外周血中生物化学指标变化 见表3,B型与C型乙肝患者病毒含量、e抗原阴性率、PC%变异率有明显差异:B型乙肝患者病毒平均含量明显低于C型患者(P＜0.001);而e抗原阴性及PC%变异率明显高于C型乙肝患者(P＜0.01)。……