侯,魏 磊,吴 军,侯 巍,孙 非*

(1.吉林大学再生医学科学研究所,吉林 长春 130021;2.空军航空大学门诊部,吉林 长春 130022;3.解放军208医院461临床部,吉林 长春 130021)

核酸适配子在生物医学领域中的应用

(1.吉林大学再生医学科学研究所,吉林 长春 130021;2.空军航空大学门诊部,吉林 长春 130022;3.解放军208医院461临床部,吉林 长春 130021)

*通讯作者

1990年Tuerk[1]和Ellingto[2]报道了一种在体外应用随机单链寡核苷酸文库筛选、扩增特定配体的技术,此种技术可以得到能与非核酸靶分子具有高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸序列,此技术称为指数富集配基的系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX),筛选出的寡核苷酸序列称为核酸适配子(aptamer)。由于核酸适配子与抗体类似,与靶物质结合的特异性和亲和力可甚至优于抗体,加上其靶分子广、稳定性强、易改造修饰等特点,可在基础研究、临床诊断、药物研发等方面得以广泛应用[3]而受到关注。本文对核酸适配子目前在生物医学领域中的应用作一综述。

1 SELEX技术原理与特点

1.1 SELEX技术的原理[1]

SELEX技术筛选核酸适配子的过程主要有以下几个步骤:①预先设计并合成寡核苷酸文库(DNA文库或RNA文库)。文库中的寡核苷酸的两端是固定序列(可依此设计PCR扩增的引物),中间随机排列约25-30个寡核苷酸,所以文库的总量可达l014-15;②文库的筛选。将靶分子与文库进行混合孵育,使其能与靶物质特异性结合,形成靶物质-寡核苷酸复合物,后可采取滤膜法、磁珠法、毛细管电泳法或柱层析等不同的分离方法,将与靶分子结合的寡核苷酸从文库中分离出来。……