解继胜，张海燕，都镇先，邓娓娓，王华芹

（1.右江民族医学院 组织胚胎学教研室，广西 百色 533000；2.中国医科大学 附属第一医院老年病干诊科；3.中国医科大学 附属第一医院内分泌科，沈阳 110001；4.中国医科大学 基础医学院生化与分子生物学教研室，沈阳 110001）

近来研究显示［1］肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）能诱导许多肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞基本没有影响，因而可能成为很有前景的抗癌药。但甲状腺恶性肿瘤细胞对TRAIL的敏感性具有相当的异质性［2，3］。因此，TRAIL 凋亡诱导增敏剂的发现将能有效扩展TRAIL的肿瘤治疗效应。衣霉素是一种天然抗生素，阻止细胞内N端连接寡糖类生物合成的第一步，曾用于TRAIL自发性耐药前列腺癌和获得性耐药大肠癌治疗［4］，但其增加TRAIL抗肿瘤作用分子机制尚未阐明。为此，本研究以人甲状腺未分化癌细胞为对象，通过TRAIL单用及联用衣霉素，探讨衣霉素对TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的增敏效应及其机制。

1 材料与方法

1.1 细胞株和主要试剂

甲状腺未分化癌ARO细胞株和正常甲状腺上皮细胞株HTori-3分别由美国标准生物品收藏中心和欧洲标准生物品收藏中心提供。衣霉素和可溶性TRAIL分别购于Sigma公司和R&D公司。以下抗体用于蛋白印记分析：γ-tubulin（Sigma公司），phospho S249 Rb（Abcam 公司），cyclin D1（Santa Cruz生物工程公司）。ECL试剂盒（英国Amersham生命科学公司）；脂质体2000转染试剂（Invitrogen公司）。

1.2 细胞培养及分组

2种细胞均于含10%胎牛血清1640（sigma公司）培养基中、37℃、5%CO2、饱和湿度下培养，2～3 d传代1次，均选用对数生长期细胞进行实验。按干预因素将甲状腺未分化癌细胞ARO分为TRAIL组、衣霉素组、TRAIL+衣霉素组（联合用药组）；……