王 琪，葛金英，焦利红，曹有才，李晓艳，马 良，马吉飞，王笑梅，步志高*

(1.天津农学院动物科学系，天津300384；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨 150001)

传染性法氏囊病(Infectious bursal disease，IBD)和新城疫(Newcastle disease，ND)为分别由IBD病毒(IBDV)和ND病毒(NDV)引起的禽类2种重大疫病。自上世纪80年代以来，欧洲及我国相继出现IBDV超强毒株(very virulent IBDV，vvIBDV)的流行[1]，该病能够引起鸡免疫机能障碍，对其他疾病的易感性增加；ND也给养禽业造成重大经济损失。因此，预防和控制这两种烈性传染病对养禽业的发展具有重要意义。

NDV作为一种活病毒载体具有独特优势：可同时诱导全身性体液免疫、局部粘膜免疫以及细胞免疫；可通过饮水、喷雾、滴鼻、点眼或肌肉注射等途径免疫；La Sota疫苗株长期用于家禽防疫，其安全性已被充分证明。Ge等利用反向遗传技术，构建表达H5N1禽流感HA基因重组NDV疫苗已经上市，该疫苗显示NDV具有作为活病毒载体疫苗应用的潜力[2]。

鸡胚免疫接种(Chicken embryo immunization)是指对一定胚龄的鸡胚接种疫苗，使得雏鸡出壳时至出壳后几天内具有特异性主动免疫力，该方法能够有效降低生产成本，具有产生免疫早、应激反应低、污染少等优点[3-4]。研究表明通过胚胎免疫来预防ND[5]和IBD[6]是安全有效的。

本研究选用表达vvIBDV VP2基因的重组NDV(rL-VP2)，用不同剂量对18胚龄SPF鸡胚进行免疫，确定该疫苗用于胚胎免疫的最佳免疫剂量，并对免疫后的安全性和有效性进行评估，为该重组二联活载体疫苗的应用奠定基础。

1 材料和方法

1.1 病毒株、鸡胚和雏鸡 rL-VP2疫苗株由哈尔滨兽医研究所人畜共患病研究室研制并保存；……