严一红 周 红 周保成 文海平 许国莹 周 芳 (江苏大学基础医学与医学技术学院,镇江 212013)

抗磷脂综合征(Antiphospholipid syndrome,APS)是一种非器官特异性自身免疫性疾病,主要临床表现为复发性动、静脉血栓及习惯性流产[1]。APS患者血清中的高滴度抗磷脂抗体(Antiphospholipid antibody,APL)与其血栓形成密切相关。研究表明,β2糖蛋白 Ⅰ(beta-2-glycoproteinⅠ,β2GP Ⅰ)是APL的主要靶抗原,其与相应抗体(anti-β2GPⅠ)形成复合物,在APS病理过程中发挥重要作用[2,3]。anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物能够诱导血液单核细胞表达组织因子(Tissue factor,TF),由TF引发的外源性凝血是APS血栓形成的主要原因之一[4,5]。进一步研究发现,anti-β2GPⅠ与其抗原β2GPⅠ交联于细胞膜表面特异受体,经信号转导系统使细胞表达TF等活性分子,导致血液高凝[6]。近年来,有关细胞表面β2GPⅠ受体的研究及相关信号途径的探讨是APS研究的关键问题,其中Toll样受体4(TLR4)的作用正受到关注。

TLR4是Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)家族成员之一,属于Ⅰ型跨膜蛋白(TypeⅠtransmembrance protein),是病原微生物模式识别受体[7]。TLR4可以识别多种配体,其中最主要的是来自细菌脂多糖(LPS)。研究发现,TLR4与其相应配体结合后,迅速引起髓样分化蛋白-2(Myeloid differentiation-2,MD-2)分子的分泌[8]。后者与TLR4的胞外区相偶联,形成TLR4/MD-2受体复合物,随即活化其下游的接头蛋白——髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)。MyD88接着招募下一个信号蛋白,最终激活核因子κ B(Nuclear factor-kappa B,NF-κ B)和有丝分裂原蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路,导致相关基因的转录[9]。

本研究前期实验发现,anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物作用于单核细胞株THP-1细胞后,细胞TLR4表达水平上升,提示TLR4受体途径在其中具有一定的作用。本文重点探讨TLR4及其分泌蛋白MD-2、接头蛋白 MyD88 在 anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导THP-1细胞TF表达中的作用,并采用紫杉醇抑制实验进一步证明TLR4及相关信号蛋白的转导效应。……