韩向北,许 多,郭亚雄,李德龙,程 宏,朱彤彤#,张婉娴*,赵丽晶,赵丽娟*

(1.吉林大学白求恩医学院病理生理教研室,吉林长春130021;2.吉林省人民医院)

郁金作为传统中草药,具有来源广泛、价格低廉、作用多样且疗效确切等优点。现代研究表明,郁金具有调节免疫、抑制中枢神经、抗自由基损伤、改善血液流变学、诱导肿瘤细胞凋亡,抗肝纤维化等作用[1-3]。单味郁金水煎剂对受损肝细胞凋亡及其机制的研究却少有报道。本实验通过检测肝细胞Bcl-2、Bax基因及蛋白水平的表达变化,探讨单味郁金水煎剂对CCl4急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡的影响及其机制。

1 材料与方法

1.1实验动物ICR小鼠,体重18-22 g,雌雄各半,由吉林大学实验动物中心提供。

1.2药物与主要试剂郁金购于吉林大药房;甘利欣注射液(连云港正大天晴制药有限公司,批号20040825)实验时用10%葡萄糖配制;四氯化碳(武汉市江北化学试剂厂,批号20021112);TUNUL试剂盒、Trizol购自美国invitrogen公司,逆转录试剂盒购于MBI公司;bcl-2、bax及GAPDH的PCR引物由上海生工生物科技有限公司合成。抗体购自美国san-ta cruz公司。

1.3动物分组与给药ICR小鼠48只,雌雄各半,随机分为6组,每组8只:阳性药组(甘利欣22.5 mg·kg-1),郁金高 、中 、低剂量组(12g·kg-1、6 g·kg-1、3 g·kg-1),空白对照组及模型组(等体积蒸馏水),灌胃给药,1次/d,连续给药7 d。第7 d给药1 h后造模。

1.4模型制备参照文献[4],各组(空白对照组除外)小鼠以0.2%CCl4橄榄油溶液10ml·kg-1腹腔注射,禁食不禁水24 h,称重后眼球取血处死,快速取出肝脏。

1.5血清生化指标检测按试剂盒方法(赖氏法)测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量。……