李洪涛 ，张新涛，刘 明，刘春国，杜金玲，石薇琳,2，孙恩成

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感开放实验室及国家禽流感参考实验室/OIE禽流感参考实验室，黑龙江 哈尔滨 150001；2.东北农业大学动物医学学院，黑龙江 哈尔滨 150030；3.黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江 大庆 163319)

禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)一直是危害养殖业的重要致病原[1]，该病毒亚型众多，基因组分节段的特点使得其容易发生基因重组，产生不同型的变异株，在人及其它哺乳动物之间引起流感流行。目前应用的疫苗多为基于血凝素(Hemagglutinin，HA)的灭活疫苗及活病毒载体疫苗[2]。在长期的选择压力下HA容易发生抗原漂移甚至抗原变异，往往造成疫苗免疫失败的发生，寻求一种通用免疫原成为近年来通用流感疫苗研究的另一热点。

流感病毒基质蛋白2(Matrix protein 2，M2)是流感病毒的第3种膜蛋白，为非糖基化Ⅲ型跨膜蛋白，该蛋白由97个氨基酸残基组成，N端24个氨基酸残基暴露在膜外，2位～24位氨基酸组成胞外功能区，即M2e。M2蛋白的主要作用是在HA合成过程中作为一种“离子泵”降低并维持细胞高尔基体内的pH，起到离子通道的作用[3]，但由于M2作为跨膜的离子通道对宿主有一定的毒害作用，因此，该类疫苗研究主要集中在各个亚型流感病毒间同源性高、序列高度保守的M2e上[4]，在疫苗开发中得到越来越多的关注，许多研究已经发现基于M2e的多种疫苗可以提供不同程度的保护力[5-7]。但是禽源M2e的亚单位疫苗在鸡体中的研究很少，本实验构建含不同拷贝数M2e基因的融合蛋白原核表达系统，研究融合蛋白的免疫原性，用纯化蛋白免疫SPF鸡后攻毒试验验证3M2e蛋白的保护力。……