荣福龙，刘永刚，孙广力，王淑杰，王洪峰，石文达，李丽琴，徐明明，孙 刚，田志军，蔡雪辉*

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001；2.东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150001；3.黑龙江省动物卫生监督所，黑龙江 哈尔滨 150090)

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起的，以妊娠母猪繁殖障碍、仔猪及育肥猪呼吸道病症为主要特征的传染病[1]。1987年该病首先发现于美国，此后呈全球性流行，给养猪业造成重大的经济损失。1996年郭宝清等报道我国首例PRRS并分离得到PRRSV CH-1a株[2]。2006年5月我国大部分省市先后暴发了以高热为主要特征的“猪高热病”，研究结果表明该病的主要病原为高致病性PRRSV变异株[3]。

荧光定量PCR(FQ-PCR)技术具有灵敏度高、快速、简捷、结果直观、重复性好、可定量分析等优点[4]。PRRSV在机体内的分布和含量的高低对研究该病的致病机理起着至关重要的作用。常规方法检测PRRSV在动物体内动态分布时，仅能做到定性和半定量分析，不能确定PRRSV在动物组织内的精确拷贝数，而FQ-PCR可以解决这一问题。因此，本实验应用建立的PRRSV荧光定量RT-PCR方法对不同代次PRRSV变异株在仔猪体内的分布进行定量分析，检测PRRSV在仔猪体内各器官的分布和载量，明确PRRSV的分布特点和动态规律，确定不同代次PRRSV变异株的主要嗜性器官，为研究PRRSV的致病机制提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 病毒株、质粒及实验动物 高致病性PRRSV变异株(HuN4株)及其经Marc-145细胞传65代致弱的HuN4-F65均由本实验室保存；荧光定量RT-PCR所需的标准阳性质粒由韦天超博士提供[5]；……