刘士刚

（德州市陵城区农业农村局 山东德州 253500）

目前，随着我国生猪养殖业已经形成集约化、规模化的养殖模式，每年的猪的养殖数量呈现逐年升高的趋势，在猪在养殖过程中，临床中抗菌药物及抗生素的添加剂不合理的使用，不仅导致其临床中细菌耐药性问题越来越严重，还导致其猪的免疫力下降，生产性能下降等一系列问题[1,2]。相关研究表明，中药及中药提取物中含有黄酮、多糖、鞣质、挥发油、生物碱、甙类等多种生物活性物质，同时含有多种蛋白质、氨基酸、维生素等多种营养物质，通过临床研究表明，中药及中药提取物具有提高动物的免疫能力、促进动物生长及调整其肠道微生物菌群结构、抗氧化能力和改善肉品质等多种药用学价值，中药及中药提取物作为替抗性药物或者添加剂，被广泛应用动物健康养殖中[3-5]。在临床中中药及中药制剂采用传统的中药粉碎方法，其利用率较低，效果不佳，严重影响药物有效成分的利用率，造成浪费，严重影响着药物的效果[6]。中药通过超微粉碎技术，可以有效改变中药的致密胞浆结构，使中药的有效成分更好地释放，提高其中药及中药制剂的有效成分在动物肠道内的生物利用度和利用率，可以弥补传统的中药粉碎缺点，提高中药及中药制剂的利用效果[7-8]。本试验以“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪为研究对象，添加不同的水平中药超微粉制剂研究其对“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪免疫机能的影响，为进一步的临床应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

中药制剂组方主要由黄芪、板蓝根各20 g，淫羊藿、熟地黄各15 g，益母草、巴戟天、杜仲、甘草各10 g，上述药材均为人用药材的下脚料，购自北京同仁堂医药有限公司。将上述中药复方按照比例在65 ℃烘干箱中进行混合烘干，先采用普通粉碎机粉碎过筛、再进行超微粉碎，过筛，制成中药超微粉制剂。

1.2 试验设计与饲养管理

在德州市的某规模化养殖场进行饲养试验，按照试验设计，采用单因素随机设计试验，选择健康的日龄相近、体重为25±2.0 kg“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪80 头随机分成4 组，每个组20 个重复，每1 头断奶仔猪为一个重复组，试验组别分别为1 组（基础精料）、2 组（基础精料+0.5%复方中药超微粉）、3 组（基础精料+1.0%复方中药超微粉）、4 组（基础精料+1.5 %复方中药超微粉），预试7 d，试验期56 d。按照本市的规模化养殖场对断奶仔猪规范的饲养管理制度进行饲养试验、疫苗免疫、驱虫及环境消毒等。“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪饲养试验过程中，日粮组成成分与营养水平表1。

表1 日粮组成成分与营养水平

1.3 血液样品采集

试验结束（56 d）后，断料12 h 空腹采血，每个试验组随机选择体重相近的10 头“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪进行保定，消毒后在前腔静脉采集血液样品，6 000 rpm/min 离心5 min 分离血清，-20 ℃保存。

1.4 免疫指标的测定

按照哺乳动物IgG、IgA、IL-2 ELISA 试剂盒说明书对采集的每个试验“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪进行免疫指标测定，测定猪瘟病毒（CSFV）和口蹄疫病毒（FMDV）的抗体水平。

1.5 数据分析

每个试验组以“平均值±标准差”表示，试验数据用SPSS 18.0软件对每个重复组的数据比较，用Duncan's 法对每个试验组数据进行多重因素比较，用 ＜0.05 表示差异显著性。

2 结果

2.1 中药超微粉制剂对断奶仔猪免疫指标的影响

试验结束（56 d）后采集血液分离血清，用酶联免疫吸附试验（EILSA）测定血清中IgG、IgA、IL-2 含量及CSFV 和FMDV 的抗体水平。结果由表2 可知，试验2、3、4 组“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪血清中IgA、IgG、IL-2 含量及FMDV 抗体水平均高于1 组，其中试验3、4 组“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪血清中IgA、IgG、IL-2 含量及CSFV 抗体水平显著高于1 组（ ＜0.05），试验2 组“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪血清中IgA、IgG、IL-2 含量及CSFV 抗体水高于1 组，试验2、3、4 组之间相比，差异性不显著。

表2 断奶仔猪免疫机能指标的结果(±S )

表2 断奶仔猪免疫机能指标的结果(±S )

项目 1组 2组 3组 4组IgA/（g/L） 1.02±0.07b 1.08±0.11ab 1.13±0.16a 1.15±0.12a IgG /（g/L） 1.15±0.12b 1.19±0.13ab 1.27±0.15a 1.30±0.12a IL-2 (pg/mL) 15.16±0.12b 16.42±0.18ab 17.72±0.22a 18.76±0.24a CSFV (pg/mL) 3.63±0.15b 3.74±0.23ab 4.43±0.12a 4.32±0.12a FMDV(pg/mL) 1.17±0.04 1.19±0.22 1.21±0.03 1.21±0.21

3 讨论

相关研究表明，动物体内免疫系统主要包括细胞免疫和体液免疫，其中体液免疫是由免疫球蛋白介导的，常见的免疫球蛋白有IgA、IgG、IgM 等，这些免疫球蛋白尤其在动物抗感染免疫中起着重要作用。细胞免疫主要是由细胞因子介导的，常见的细胞有IL-2、IL-4、IL-6 等，其中IL-2 是由淋巴细胞分泌的细胞因子，主要作用介导动物机体内细胞免疫[4-5]。CSFV 和FMDV 在养猪过程中危害比较大，且临床中没有有效的药物进行预防，主要通过疫苗接种获得相应的免疫力，其疫苗接种后抗体水平的高低直接影响着疫苗的免疫效果及猪对该病的抗感染能力[9-10]。国内许多研究表明，中药制剂及中药提取物中富含有多种活性物质，同时含有多种氨基酸、维生素及矿物质等营养物质，可以有效提高动物免疫机能，在牛、羊、鸡、猪多种等动物养殖过程中被广泛应用[11]。本试验研究表明，试验2、3、4 组“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪血清中IgA、IgG、IL-2 含量及FMDV 抗体水平均高于1 组，其中试验3、4 组“杜×长×大'三元杂交断奶仔猪血清中IgA、IgG、IL-2 含量及CSFV 抗体水平显著高于1 组，说明不同的中药超微粉制剂可以提高“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪的免疫机能指标及CSFV 和FMDV 的抗体水平，以基础精料+1.0%复方中药超微粉、基础精料+1.5 %复方中药超微粉添加较适宜。可以在临床中推广与应用。■