李晨　樊金宇　李春燕　路遥　张帆　闫海润

【摘要】 目的：探讨抗磷脂抗体（antiphospholipid antibodies，APLs）、凝血功能指标对系统性红斑狼疮（SLE）患者血栓形成的预测价值。方法：选取2021年4月-2022年8月牡丹江医学院附属红旗医院风湿免疫科85例SLE患者，按照是否合并血栓形成将其分为血栓组（n=33）与非血栓组（n=52）。比较两组基本临床资料、APLs、凝血功能指标，根据受试者工作特征（ROC）曲线评估不同指标对于SLE患者合并血栓形成的预测价值，并分析SLE患者合并血栓形成的影响因素。结果：两组年龄、性别、有无高血压、有无狼疮性肾炎、TAT、FIB、APTT、IgA-ACL、IgM-ACL比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。血栓组TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ均高于非血栓组，差异均有统计学意义（P<0.05）。经ROC曲线分析显示，TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ、各指標联合检测曲线下面积分别为0.764、0.740、0.646、0.708、0.686、0.675、0.848。logistic回归分析显示，D-D（OR=8.350）、LA（OR=124.238）是SLE患者合并血栓形成的独立危险因素（P<0.05）。结论：SLE合并血栓形成患者的TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ水平呈现高表达，其中D-D、LA是SLE患者合并血栓形成的独立危险因素，在SLE血栓风险评估及血栓早期诊断中价值较高。

【关键词】 系统性红斑狼疮 血栓形成 抗磷脂抗体 凝血功能

Study on the Detection of Coagulation Function Indexes and Antiphospholipid Antibodies in SLE Patients with Thrombosis/LI Chen， FAN Jinyu， LI Chunyan， LU Yao， ZHANG Fan， YAN Hairun. //Medical Innovation of China， 2023， 20（09）： -117

[Abstract] Objective： To investigate the predictive value of antiphospholipid antibodies （APLs） and coagulation function indexes of thrombosis in patients with systemic lupus erythematosus （SLE）. Method： A total of 85 SLE patients in the Rheumatology and Immunology Department of Hongqi Hospital Affiliated to Mudanjiang Medical University from April 2021 to August 2022 were selected. They were divided into thrombus group （n=33） and non-thrombus group （n=52） according to whether there was thrombosis. The basic clinical data， APLs and coagulation function indexes between the two groups were compared. The predictive value of different indicators for SLE patients complicated with thrombosis was evaluated according to the participant operating characteristic （ROC） curve， and the influencing factors of SLE patients complicated with thrombosis were analyzed. Result： There were no significant differences in age， sex， hypertension， lupus nephritis， TAT， FIB， APTT， IgA-ACL and IgM-ACL between the two groups （P>0.05）. TM， D-D， PT， LA， IgG-ACL and anti-β2GP Ⅰ in thrombus group were higher than those in non-thrombus group， with statistical significance （P<0.05）. The ROC curve analysis showed that the areas under the curve of TM， D-D， PT， LA， IgG-ACL， anti-β2GP Ⅰ and combined detection of all indicators were 0.764， 0.740， 0.646， 0.708， 0.686， 0.675 and 0.848， respectively. logistic regression analysis showed that D-D （OR= 8.350） and LA （OR=124.238） were independent risk factors for thrombosis in SLE patients （P<0.05）. Conclusion： The levels of TM， D-D， PT， LA， IgG-ACL and anti-β2GP Ⅰ are highly expressed in SLE patients complicated with thrombosis， among which D-D and LA are independent risk factors for SLE patients complicated with thrombosis， and they are of high value in SLE thrombosis risk assessment and early diagnosis.

[Key words] Systemic lupus erythematosus Thrombosis Anti phospholipid antibody Coagulation function

First-author's address： The First Clinical Medical College of Mudanjiang Medical University， Mudanjiang 157011， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.09.027

系统性红斑狼疮（SLE）属于多因素导致，对多系统产生危害的慢性自身免疫性疾病，临床表现多种多样。血栓形成是SLE的常见并发症之一，对患者的死亡率有重要的影响，但血栓形成的确切机制尚不清楚[1]。凝血功能异常是SLE患者的常见特征，近几年的研究认为由于SLE患者免疫因子的作用，如补体激活产物、免疫复合物等，损伤了血管内皮细胞，破坏了其对血栓和抗血栓形成之间的平衡，一般会出现凝血、纤溶紊乱，导致SLE患者有血栓形成的风险[2]。抗磷脂抗体（APLs）是一类与动静脉血栓形成有关的能够与带负电荷磷脂-蛋白复合物的自身抗体，APLs可以出现在正常人群中，也可以出现在其他自身免疫性疾病中，主要有狼疮抗凝物（lupus anticoagulant，LA）、抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibody，ACL）、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体（anti-β2GPⅠ antibody，抗β2GPⅠ）等。有研究发现在20%～30%的SLE患者中发现了APLs[3]。因此，本研究对患有SLE的85例患者进行研究，对其临床资料、APLs、凝血功能指标水平进行分析，旨在为SLE患者发生血栓的早期诊断及血栓风险评估上提供更多的参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2021年4月-2022年8月就诊于牡丹江医学院附属红旗医院风湿免疫科SLE患者共85例。纳入标准：依据为2012年SLE国际合作组织（SLICC）出台的最新SLE诊断标准确诊为SLE；年龄18～80岁；无近期或长期服用影响凝血功能药物。排除标准：严重和终末期慢性肾脏病（第Ⅳ、Ⅴ期）；有基础性肝病患者，明显的肝功能不全；遗传性易栓症、重度机体病毒或细菌感染、肾病综合征和慢性心力衰竭；有其他严重并发症。其中男19例，女66例；年龄18～76岁，平均（48.79±15.29）岁。按照是否合并血栓形成将其分为血栓组（n=33）与非血栓组（n=52）。本研究由医院医学伦理委员会进行审批，参与者或其家属在知情同意书上签字。

1.2 方法 （1）收集患者的基本临床资料（包括年龄、性别、有无高血压、有无狼疮性肾炎）。（2）标本收集：用含0.3 mL 3.2%枸橼酸钠抗凝剂的采血管，抽取患者组的血液2.7 mL，1︰9抗凝。将血液置于离心机上，以3 000 r/min离心10 min，筛除高度乳糜、溶血以及高胆红素等的标本，分离上层血浆，按照各实验所需（包括可能的复检用量）分装于冷冻管内，在30 min内凍存于-80 ℃恒温冰箱。促凝管1 500 r/min离心10 min分离血清，于30 min内-80 ℃冻存。（3）APLs的检测：采用磁微粒化学发光法检测血清抗β2GPⅠ和IgA/IgM/IgG-ACL，仪器为SMART6500HOB，试剂为配套检测试剂盒；采用蝰蛇毒凝固法（DRVVT）法检测枸橼酸钠血浆LA，仪器为STAGO凝血分析仪，仪器为配套检测试剂盒。分别通过测定LA筛选试验和确诊试验，计算LA标准化比值。LA标准化比值=筛选比值/确认比值。（4）凝血功能指标的检测：全自动化学发光测定栓调节蛋白（TM）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT），仪器为西森美康HISCL-5000，试剂为配套化学发光试剂。凝固法测定活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）、胶乳免疫比浊法测定D-二聚体（D-D）、仪器为日本积水CP3000全自动血凝仪，试剂为配套检测试剂盒。

1.3 统计学处理 采用SPSS 26.0统计软件分析。首先用K-S检验对计量数据进行正态性检验，正态分布的计量数据使用（x±s）表示，比较采用t检验；不服从正态分布的数据用[M（P25，P75）]表示，比较采用Mann-Whitney U检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验；根据受试者工作特征（ROC）曲线评估不同指标对SLE患者合并血栓形成的预测价值，并通过logistic回归分析进行多因素分析。P<0.05表示结果有统计学意义。

2 结果

2.1 SLE患者合并血栓形成的单因素分析 两组年龄、性别、有无高血压、有无狼疮性肾炎、TAT、FIB、APTT、IgA-ACL、IgM-ACL比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；血栓组TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ均高于非血栓组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ对

SLE患者合并血栓形成的ROC曲线分析 以无血栓组作为阴性对照组，根据TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL和抗β2GPⅠ的变化，绘制各个指标的ROC曲线趋势。分析各指标的ROC曲线下面积，结果发现TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ、各指标联合检测曲线下面积分别为0.764、0.740、0.646、0.708、0.686、0.675、0.848，见图1、表2。

2.3 SLE患者合并血栓形成的多因素logistic回归分析 为了排除各个单因素之间的相互干扰，本研究对所有有可能影响SLE患者血栓成因使用logistic回归分析，将其中具有差别的变量引入回归分析模型中，应变量是SLE患者血栓是否出现（否=0，是=1），自变量为TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPI，以实际值纳入。logistic回归分析显示：D-D（OR=8.350）、LA（OR=124.238）是SLE患者合并血栓形成的独立危险因素（P<0.05），见表3。

3 讨论

SLE是一种常见的自身免疫性疾病，临床表现比较复杂。血液指标变化多样，临床的多数表现与血栓形成密切相关[4]。基于此，本研究从凝血功能指标、抗磷脂抗体水平等方面入手，对SLE患者血栓形成的因素进行探讨，以期为SLE患者早期诊断及血栓风险评估提供依据。

本研究结果显示，血栓组的TAT、FIB、APTT、IgA-ACL、IgM-ACL水平与非血栓组相比，差异均无统计学意义（P>0.05），提示上述指标在SLE血栓患者水平变化不大；而血栓组TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ与非血栓组相比，差异均有统计学意义（P<0.05），提示TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ可能与SLE患者血栓形成风险相关。分析如下：D-D是纤溶酶降解交联纤维蛋白降解产物的一种小片段，血浆水平增高通常表明高凝-纤溶状态[5]。研究表明，在临床中常发现SLE患者D-D水平升高[6-7]，表明存在继发性的高纤维蛋白溶解，且是SLE患者血栓形成的独立危险因素，与黄丹等[8]研究结果相符。TM是一种内皮膜糖蛋白，与内皮损伤和炎症过程有关，当内皮细胞损伤后，TM会被释放到血液中，与凝血酶一起激活蛋白C（PC）。文献[9]报道，TM在血栓形成、动脉粥样硬化、中风、癌症和炎症等病理条件的调节中发挥重要作用。SLE是一种炎症性疾病，可导致内皮细胞被破坏可导致TM水平的增加。一旦组织因子（TF）暴露导致内皮损伤，凝血级联的外源性途径可能被激活，最终形成纤维蛋白，并易引发血栓事件[10]。本研究ROC曲线下统计分析结果显示：TM对SLE血栓形成的诊断具有较好的特异度和敏感度。APTT和PT分别是反映机体内外源性凝血途径是否正常的检测实验指标，本研究结果显示血栓组PT水平存在异常，与非血栓组相比差异有统计学意义（P<0.05），说明SLE患者体内存在高凝状态。

SLE患者的动脉硬化的患病率增加，除了动脉硬化作为SLE心血管事件的潜在原因之外，发生心血管事件的风险还取决于相关免疫因素。其中最重要的是APLs，APLs可以对内皮细胞和其他细胞产生直接的促炎和促血栓的作用，并且还会干扰凝血[11]。LA作为抗磷脂抗体之一，是一类针对带阴电荷磷脂、磷脂结合蛋白的自身抗体，在体外干扰依赖磷脂的凝血试验，而在体内主要发挥促血栓形成作用[12]。LA是公认的SLE患者出现血栓或者血栓复发的重要成因[13]。根据研究显示，SLE患者如果LA呈阳性，那么就会影响其凝血功能，增加血栓发生风险，因此在临床中，要对这类患者的管理更加关注[14]。本研究结果显示，SLE血栓组患者LA明显高于非血栓组（P<0.05），与饶绘等[15]的研究结果一致。ACL与血小板减少、中枢神经系统损害、血管栓塞、流产等临床症状有一定的关系，ACL所介导的血管炎可能是造成SLE多系统损伤的原因[16]。按照免疫学的分型，ACL可以分为IgA-ACL、IgM-ACL、IgG-ACL 3个亚型。研究发现在SLE患者中IgG-ACL的存在與血栓形成和胎儿丢失有关[3]。尽管IgA-ACL通常与IgG和/或IgM-ACL一起存在，但IgA-ACL对抗磷脂抗体综合征的诊断具有高特异度，但敏感度比较低[17]。姚文瑛等[18]结果显示IgG-ACL与SLE患者血栓形成具有密切的关系。研究表明，β2GPⅠ的结构域Ⅰ是APLs结合的主要位点，抗β2GPⅠ抗体在SLE中的检出率为35%，在临床上可用于识别具有较高动脉和静脉血栓形成风险的SLE患者[19]。

综上所述，SLE合并血栓形成患者的TM、D-D、PT、LA、IgG-ACL、抗β2GPⅠ水平呈现高表达，其中TM对SLE合并血栓的诊断效能最高（0.764），其次是D-D（0.740），PT的诊断效能最差（0.646）。各指标联合检测的曲线下面积最大（0.848），敏感度为66.7%，特异度98.1%，提示上述检测指标可能与患者发生血栓存在联系。D-D、LA是系统性红斑狼疮患者血栓形成的独立危因素，SLE患者血栓形成与D-D、LA密切相关。但是，SLE患者血栓形成的各种生物标志物还尚未明确，是单一指标还是需要多种生物标志物进行联合检测对早期的SLE血栓形成患者进行诊断？这将是今后研究工作的重点，需要开展更大规模的临床实验研究，为临床医生及时对SLE患者血栓形成的早发现、早预防、早治疗提供可靠的数据支持，将SLE血栓形成的危害降到最低。

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（收稿日期：2023-01-16） （本文编辑：田婧）