文皓頲 饶印保 陈建维 袁海铭 钟小群#

（1 江西江中安可科技有限公司 南昌330096；2 江西省医疗器械检测中心 南昌330029）

鬼针草属植物的药用历史最早记载于唐代陈藏器《本草拾遗》中，名为鬼钗草，因着人衣如针，故亦名为鬼针[1]。鬼针草具有清热解毒、祛风除湿、活血消肿之功效，主要成分为黄酮，包括查尔酮甙类、黄酮类及苷类、橙酮类、聚炔苷类等成分，还含有酯类、酸类成分等[2]。三叶鬼针草（BIDENS PILOSA）提取物收载在《已使用化妆品原料名称目录》（2015 年版）上，是可用化妆品原料。其提取工艺研究多采用水、醇提取，树脂纯化，溶剂萃取等方法[3～9]，常以总黄酮含量为指标，对外观、溶化性没有做要求。然而作为化妆品原料，总黄酮含量只是要求之一，还需要有良好的感官评价及稳定性。因此，本研究以鬼针草为原料，以提取物的色泽、总黄酮含量、提取率、水复溶性等为指标，优选了其提取、纯化、精制工艺，测定了其在不同化妆品原料中的溶解度。现报道如下：

1 仪器与试药

1.1 仪器 UV-2550 型紫外分光光度计（日本岛津公司）；80-2B 型高速离心机（上海安亭科学仪器厂）；KQ-250DE 型超声波清洗器（昆山市超声波仪器有限公司）；PB203-N 分析天平（梅特勒-托利多公司）；Sartorius ME5 微量电子分析天平（德国赛多利斯公司）。

1.2 试药 芦丁对照品（批号0080-9705，中国药品生物制品检定所）；鬼针草采集于江西省赣州市石城县，均经江西省医疗器械检测中心朱良辉研究员鉴定为Bidens pilosa L.，割取地上部分，切段，晒干，备用。

2 方法与结果

2.1 鬼针草经不同溶剂提取结果 称取6 份鬼针草粗段，每份250 g，分别用8 倍量的水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇作为溶剂，回流提取3 次，每次1 h，合并提取液，回收溶剂并浓缩至每1 毫升含1 g 生药的药液，冷藏24 h，分取上清液，浓缩并减压干燥，粉碎，过80 目筛，备用。测定黄酮含量，计算干膏得率、转移率，观察固体物色泽、水复溶性、水溶液色泽、10%氢氧化钠中溶解性，结果显示，鬼针草经以上不同的溶剂提取后，各指标有比较大的差异，提取物颜色深，不适宜直接用作化妆品原料，因此，以黄酮转移率最高的70%乙醇为初步提取溶剂。见表1。

表1 鬼针草经不同溶剂提取结果

2.2 纯化工艺的选择

2.2.1 药材提取液制备 采用2.1 中黄酮转移率最高的提取溶剂70%乙醇提取20 kg 药材，浓缩至约1 g/ml 的浓度，250 ml 为一份，备用。

2.2.2 鬼针草提取液经大孔吸附树脂纯化处理结果 药液分别加入至已预处理好的大孔吸附树脂D101、D201、D301、HPD-100、AB-8、HP-20，树脂用量均为80 g，柱长/直径约为12.5:1，控制流速为4 ml/（min·kg），均先用1 个柱体积量的水洗脱，再依次用1 个柱体积量的30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇洗脱，收集3 种乙醇洗脱液，浓缩，干燥，粉碎，过筛，称定重量。采用AB-8 树脂进行纯化效果最佳。见表2。

表2 鬼针草提取液经大孔吸附树脂纯化处理结果

2.3 乙酸乙酯萃取不同次数萃取结果 取2.2.1 项下的药材提取液（1 g/ml），采用优选出来的纯化工艺纯化，并浓缩成2 g/ml 的溶液，50 ml 为一份，分别用同体积的乙酸乙酯萃取1、2、3、4、5、6、7 次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，减压干燥，粉碎，过筛，称定重量，测定黄酮含量，计算干膏得率、纯化转移率、总转移率。结果显示，乙酸乙酯萃取次数4 次及以上时，干膏得率及提取物黄酮含量均相近，没有显著性差异，因此确定精制方法为乙酸乙酯萃取4 次。见表3。

表3 乙酸乙酯萃取不同次数萃取结果

2.4 提取物溶解度的初步测定

2.4.1 提取物的制备 取2.2.1 项下的药材提取液（1 g/ml），用优选的精制工艺制备提取物备用。

2.4.2 鬼针草提取物溶解度初步测定结果 精密称取提取物细粉1 g 数份，分别记录初始重量，在室温为20℃条件下，逐渐加入至盛有5 ml 水、1%盐酸、1%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醇、甘油、丙二醇、异丙醇、正丁醇、水溶性霍霍巴油、聚乙二醇400（PEG400）、二甲基亚砜、吐温80、司盘80、油酸、肉豆蔻酸异丙酯中，每隔5 min 强力振摇30 s，观察30 min 内的溶解情况。视溶解情况逐渐加入粉末，如无目视可见的溶质颗粒，即为完全溶解，称定剩余的细粉，计算已经溶解的粉末量，并计算初步的溶解量。见表4。

表4 鬼针草提取物溶解度初步测定结果

3 讨论

鬼针草药材质地松脆，易干燥、切割、粉碎，因此本研究采用单因素多水平法详细考察了不同提取溶剂、不同型号的大孔吸附树脂、不同萃取溶剂的提取和纯化效果，最终确定工艺为：以70%乙醇为溶剂，回流提取3 次，每次1 h，提取液浓缩至1 g/ml，加到已经预处理好的AB-8 大孔吸附树脂，柱长/直径约为12.5:1，先用1 个柱体积量的水洗脱，再用70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，浓缩成2 g/ml 的溶液，用乙酸乙酯萃取4 次，合并萃取液，回收溶剂，浓缩，减压干燥，粉碎，过80 目筛，即得。

植物提取物的溶解性能直接影响化妆品的成型、外观、稳定性及效果，但有关中药提取物溶解性能的报道极少。本研究参照中国药典制剂通则颗粒剂溶化性检查方法[10]，采用定量溶剂溶解法，测定了鬼针草提取物在16 种常用化妆品溶剂中的溶解度，找到了其溶解特性，并观察其在各溶液的色泽及状态外观，结果该提取物在碱性溶剂中的溶解度比较大，能得到色泽和外观都比较宜人的溶液。