叶水文，张楠，饶美英

人类血小板（PLT）血型抗体是指能导致PLT破坏的人类白细胞抗原（HLA）抗体和人类血小板抗原(HPA）抗体的总称[1]。研究证实，妊娠期女性血液中的PLT血型抗体会导致早期流产、新生儿同种免疫血小板减少性紫癜(NAITP)等一系列不良反应[2-5]。本文采用固相凝集法对孕龄36～40周的女性PLT血型抗体进行检测，以探讨该抗体与分娩次数及早期流产的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2016年4月-2016年12月在南昌大学第二附属医院产科进行产前检查的孕龄为36～40周的初产妇142例、经产妇244例（既往分娩次数≥1）、无早期流产史120例、有早期流产史的246例（早期流产次数≥1）为研究对象。四组孕妇皆无输血史且不规则抗体筛查阴性。四组孕妇的年龄、分娩方式、妊娠周期等无统计学差异。排除标准：⑴知情拒绝者。⑵拟提前终止妊娠者。随访后期提前主动终止妊娠的孕妇，或因其他意外情况等提前被动终止妊娠的孕妇 （如摔伤、车祸、孕妇因患其他疾病抢救母亲生命时需舍弃胎儿等情况）。

1.2 方法

1.2.1 标本的采集 采集受检者的静脉血液标本3ml，并将其置于含有乙二胺四乙酸二钾的采血管中进行抗凝处理，在3000r/min的速度下离心15min，吸取上层血浆。

1.2.2 抗体的检测 选择进口的固相凝集法血小板抗体检测试剂盒，严格按照试剂盒说明进行操作：⑴向反应孔中加入50μl血小板悬液，轻摇反应板10s，平板离心机50g离心5min，使血小板固定在反应孔底部，倒出反应孔中液体，洗涤工作液洗涤3次，最后一次洗涤后将反应板倒置于吸水纸上吸干残余液体；⑵立即向每个反应孔中加入100μl低离子强度溶液，并分别在相应孔中加入50μl样本、阳性及阴性对照，封口胶封好混匀置于37℃水浴孵育35min；⑶弃去封口膜洗涤5次，加入50μl抗人IgG及指示红细胞，轻轻振荡混匀，200g离心5min。红细胞平铺于反应孔的底部表面或者红细胞只能够结合到部分孔底部的情况为阳性；以红细胞在反应孔底部中央发生红细胞聚集的情况为阴性。

1.2.3 统计分析 采用SPSS 22.0软件进行统计学分析，计数资料相关性分析采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 初产妇组与经产妇组PLT血型抗体检测结果比较 初产妇组阳性例数8例，阳性率5.6%（8/142）。经产妇组阳性例数30例，阳性率12.3%（30/244），两组比较差异有统计学意义 （χ2=4.54，P<0.05）。 见表 1。

表1 初产妇组与经产妇组PLT血型抗体的阳性率比较

2.2 无早期流产组与有早期流产组PLT血型抗体检测结果比较 无早期流产组阳性例数8例，阳性率6.8%（8/120）。有流产史组阳性例数28例，阳性率11.4%，两组比较差异有统计学意义 （χ2=3.91，P<0.05）。 见表 2。

表2 无早期流产组与有早期流产组PLT血型抗体的阳性率比较

3 讨论

PLT血型抗原主要分为两类：一类是为非特异性抗原，与AB0血型系统和HLA有关，另一类是血小板特异的抗原（HPA），主要有5个血型系统为HPA-1 （Zw）、HPA-2 （Ko 系统）、HPA-3、HPA-4、HPA-5[6]。PLT血型抗原不合是导致机体产生PLT血型抗体的主要原因，机体被HPA或HLA抗原免疫获得PLT血型抗体，这种免疫可由输血、妊娠而获得[7-10]。研究显示母婴PLT血型不合的妊娠会导致母亲对胎儿PLT抗原免疫产生抗体，这种IgG抗体可以通过胎盘屏障，对胎儿的血小板进行破坏，胎儿的血小板减少则会诱发流产；即使未出现早期流产的情况，也可能因新生儿血小板减少造成新生儿同种免疫性血小板减少症[11-13]。

本研究采用固相凝集法对妊娠期妇女的HLA抗体和HPA抗体进行检测[14]，发现既往有分娩史的经产妇血小板血型抗体阳性率为12.3%，明显高于初产妇（5.6%），既往分娩史组与初产妇组有显著差异（P＜0.05）。有早期流产史的女性PLT血型抗体阳性率为11.4%，明显高于无早期流产史的女性（6.8%），有早期流产史组与无早期流产史组有显著差异（P＜0.05）。且国内文献报道对2038例孕妇进行血小板抗体筛查，结果发现妊娠史（包括流产、分娩）的经产妇PLT血型抗体阳性率为12.5%[15]，与本文高度一致。从而进一步证实PLT血型抗体与既往分娩和早期流产密切相关。但在抗体筛查过程中发现有2例孕妇PLT血型抗体阳性，且无分娩史及早期流产史，查其病例无输血史，其抗体可能与药物或试验因素有关。

目前国内尚未对PLT抗体的进行常规孕检，但随着二胎的开放，母婴PLT抗原不合的妊娠概率越发增大，增加了流产风险。综上，为了预防和减少妊娠期女性早期流产以及新生儿同种免疫血小板减少性紫癜(NAITP)的发生，对孕妇尤其是既往有分娩或早期流产的妊娠女性用固相凝集法进行PLT抗体筛查十分必要。