萨福克肉羊精液冷冻保存技术浅析

2017-10-11马玉英新疆石河子工程技术学校832000贺严峰新疆塔城地区塔城市畜牧兽医站830049

中国畜禽种业 2017年1期

马玉英（新疆石河子工程技术学校 832000）贺严峰（新疆塔城地区塔城市畜牧兽医站 830049）

萨福克肉羊精液冷冻保存技术浅析

马玉英（新疆石河子工程技术学校 832000）贺严峰（新疆塔城地区塔城市畜牧兽医站 830049）

为充分发挥和提高优良萨福克种公羊的利用率，本试验对进口萨福克肉羊精液冷冻保存技术进行研究，试验设计4个萨福克羊冷冻精液稀释液配方，pH值6.0～7.0，挑选14只健康成年种公羊，调教采精、制冻。结果显示：稀释液C的冷冻后精子活力显著高于稀释液A的冻后精子活力（P＜0.05），极显著高于稀释液B和稀释液D的冻后精子活力（P＜0.01）；冻精在40～42℃解冻时精子活力效果最好。故使用稀释液C制作进口萨福克肉羊冷冻精液并在42℃解冻效果较好，可在生产实践中推广使用。

萨福克羊；精液；稀释液；冷冻保存；试验

世界畜牧业发展的主要特征是规模化和现代化，发展趋势是绿色、安全。而我国肉羊业产业化水平低，农户养羊多分散饲养，经济效益差，新疆更是如此。种羊市场发展异常，种羊价格居高不下，严重影响肉羊良繁生产体系的形成，阻碍肉羊产业化发展。

精液冷冻保存是人工授精技术的关键技术环节。它解决了精液长期保存问题，使精液不受时间、地域和种畜生命的限制，极大限度的发挥和提高优良种公羊的利用率，加速品种育成和改良步伐。萨福克羊是国际公认的肉羊优良品种之一，生长速度快，产肉率高，与新疆本地的原始品种杂交，其饲料转化率高，适应性强，深受新疆人民喜爱。为充分发挥萨福克种公羊的遗传特性，满足新疆肉用种公羊供种能力不足的现状，本试验对进口萨福克羊精液细管法冷冻保存技术进行研究，以期在生产实践中达到应用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 种公羊

试验选择天山生物公司膘情中等、体况良好、性欲旺盛的14只进口萨福克公羊。

1.1.2 药品

葡萄糖，蔗糖，柠檬酸钠，Tris，甘油，PS双抗，卵黄，法国卡苏公司生产的无卵黄精液稀释原液。

1.1.3 仪器设备

OLYMPUS体视显微镜，卡苏微型精液分装机，水浴锅，高压锅，震荡仪，电子天平，冰箱等。

1.2 方法

1.2.1 稀释液的配制

稀释液 A由葡萄糖（1.9g）、蔗糖（0.8g）、 Tris （0.8g）、柠檬酸钠（1.9g）、卵黄（10ml）、甘油（12ml）、 PS(20万IU)组成，稀释液B由葡萄糖（3.4g）、柠檬酸钠（2.0g）、卵黄（10ml）、甘油（12ml）、PS(20万IU)组成，稀释液C由葡萄糖（2.0g）、蔗糖（1.4g）、柠檬酸钠（2.0g）、卵黄（10ml）、甘油（12ml）、PS(20万IU)组成，由按稀释液所示成分和剂量配制基础液100ml，煮沸消毒后置于4℃冰箱保存备用。

1.2.2 精液采集

用假阴道按常规方法进行采精，一般连续采精4d休息1d。精液采出后，立即于37℃下进行常规品质检查，要求原精液无异味，色泽为乳白色，精子形态正常，原精液活力要求不低于0.7，密度为 “密”级的精液供试。

1.2.3 精液的稀释和平衡

鲜精与基础液按1：1～1：2比例等温第一次稀释，然后用8～10层纱布包裹储精瓶，降到室温后置于4℃冰箱中平衡1h。将经过第一次稀释和平衡的精液在冰箱内按1：1比例加入含冷冻保护剂的等温稀释Ⅱ液后，用精液分装机分装到0.25ml细管内并封口，再放入4℃的冰箱中继续平衡2～4h。

1.2.4 精液的冷冻与保存

将精液细管置于自制冷冻漂浮器上 (距离液氮表面2～2.5cm)熏蒸10min后，投入液氮中冷冻保存。

1.2.5 精液解冻

从液氮罐中取出精液细管，迅速浸入37～48℃水浴中，轻轻摇动直至融化。

1.2.6 精子活率测定

将解冻精液制片后置于配有37℃恒温台显微镜下，放大400倍检查精子。

2 结果与分析

2.1 不同稀释液对精子冷冻保护的效果

由表1可以看出，C稀释液在二次稀释中加入蔗糖，解冻后效果最好，精子活力极显著高于B稀释液和D稀释液（P＜0.01），显著高于A稀释液（P＜0.05）。

2.2 不同解冻温度对精子活力的影响

由表2可以看出，在40～42℃解冻的精子活力效果最好，实践中通常用42℃解冻。

3 小结与讨论

3.1 不同营养剂对精液冷冻的影响

糖类是精液稀释液的重要组成部分，它可直接被精子分解产生能量提供给精子，同时也是一种重要的保护剂。糖对稀释液渗透压和精子膜都有一定影响，防止冰晶形成等保护冷冻对精子造成的伤害。目前国内外均有报道，糖类 (葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、棉籽糖)能通过对质膜的稳定，发挥其对精子的保护作用。几种糖类稳定细胞膜蛋白质-脂质复合物的性能大小顺序为棉子糖＞蔗糖＞乳糖＞果糖＞葡萄糖，而且两种糖配合使用的效果比单一使用较好。因此，C稀释液组的精子活力极显著高于B稀释液组合D稀释液组。