史加宁 耿小平 汪 泳

(安徽医科大学第二附属医院普外科，安徽 合肥 230601)

胃癌患者外周血MDA、CK-18及CA72-4水平变化及临床意义

史加宁 耿小平 汪 泳

(安徽医科大学第二附属医院普外科，安徽 合肥 230601)

目的探讨胃癌患者外周血丙二醛(MDA)、角蛋白(CK)-18及CA72-4水平变化及临床意义。方法选取原发性胃癌患者76例为实验组，对照组46例为正常健康体检者。入院后晨起空腹抽取肘静脉血4 ml，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组血清中MDA、CK-18及CA72-4水平，不同分期MDA、CK-18及CA72-4水平之间的相关性及与胃癌临床病理特点的关系。结果实验组血清中MDA与CK-18水平明显高于对照组(P<0.01)。胃癌患者血清中MDA、CK-18及CA72-4水平随着TNM分期的增高而升高(P<0.01)；有淋巴结转移及肿瘤突破浆膜的胃癌患者血清中MDA、CA72-4水平明显高于没有淋巴结转移和肿瘤未突破浆膜层的胃癌患者(P<0.05)，MDA、CA72-4水平在是否有远处转移及病理分化程度之间无明显差异(P>0.05)；有远处转移的胃癌患者血清中CK-18水平较没有远处转移患者明显升高(P<0.01)；但CK-18水平在是否有淋巴结转移、是否突破浆膜层、病理分化程度之间无明显差异(P>0.05)。结论MDA、CK-18及CA72-4水平能够作为胃癌诊断的生化指标，作为判断胃癌预后和术后复发的参考指标。

胃癌；丙二醛；角蛋白(CK)-18；CA72-4

胃癌是发生于胃窦、贲门、胃体、全胃甚至大部分胃的恶性肿瘤，胃黏膜上皮细胞增殖/凋亡系统动态失衡，凋亡因子被抑制，胃上皮细胞不受控制的增殖、分化而形成胃癌〔1,2〕。目前临床上胃癌的治疗方法是以手术为主，放化疗为辅，早期胃癌5年生存率在90%以上，但早期胃癌无明显症状，待发现时多已是胃癌晚期〔3〕。因此，早期诊断、早期治疗是延长胃癌患者生存期的关键。肿瘤标志物是早期诊断胃癌的重要指标，但是目前胃癌肿瘤标志物特异性及敏感性较差〔4〕。研究发现〔5〕，丙二醛(MDA)与角蛋白CK-18及CA72-4在肿瘤的发生、发展、浸润和转移过程中发挥重要的作用。本文探究血清中MDA、CK-18及CA72-4水平诊断胃癌的价值及机制。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取安徽医科大学第二附属医院普外科2014年3月至2015年2月诊断为原发性胃癌的患者76例为实验组，男57例，女19例，年龄44～80岁，采用国际抗癌联盟(UICC)TNM分期标准，Ⅰ期12例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例，Ⅳ期14例；有淋巴结转移48例，无淋巴结转移28例；肿瘤突破浆膜层57例，没有突破浆膜层19例；远处转移10例，没有远处转移66例；病理高分化7例，中分化34例，低分化35例。对照组46例，为正常健康体检者，男25例，女21例，年龄〔平均(51.2±7.7)〕岁。实验组均经影像学、病理等确定诊断。两组的年龄、性别、文化程度、家庭背景等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2诊断标准 根据胃癌临床治疗指南确定诊断标准〔6〕：①早期患者有恶心、呕吐或类似于消化性溃疡的上消化道症状；②食欲减退、消瘦、乏力、贫血；③胃部疼痛及体重减轻；④X线钡餐检查有充盈缺损；⑤螺旋CT、MRI等影像学检查能够辅助诊断和临床分期；⑥纤维胃镜病理活检是诊断胃癌的金标准。

1.3纳入标准 符合原发性胃癌的诊断标准；患者年龄40～80岁，能为自己做主；患者及家属对本研究了解知情并自愿参与和签署知情同意书。

1.4排除标准 ①精神、神志异常不能配合者；②患有严重心、肝、肾、肺、脑疾病者；③患有肺癌、肝癌、肾癌、脑癌等其他恶性肿瘤者；④患有获得性免疫缺陷综合征、梅毒、病毒性肝炎、结核等传染病者；⑤患有再障、白血病等血液性疾病者；⑥近3个月服用抗幽门螺杆菌及肿瘤治疗患者。

1.5方法

1.5.1血液采集 所有患者在未进行任何介入、药物和手术治疗前，于晨起空腹抽取肘静脉血4 ml，加入含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂的真空管中混匀，并立即将样本置于4℃的冰箱中2 h，3 000 r/min离心20 min后分离血清，将血清置于EP管中并放于-80℃冰箱中保存待检。

1.5.2外周血MDA、CK-18及CA72-4水平检测 标本解冻后，采用ELISA方法检测标本中MDA、CK-18及CA72-4水平。试剂盒由武汉优尔生科技股份有限公司提供，并且严格按照说明书操作。

1.6统计学方法 应用SPSS17.0软件，正态计量资料用组间比较采用t检验，两组之间相关性采用Spearman相关分析。

2 结 果

2.1两组血清MDA、CK-18及CA72-4水平比较 实验组血清MDA、CK-18及CA72-4水平明显高于对照组(P<0.01)。见表1。

表1 两组血清MDA、CK-18及CA72-4水平比较

2.2胃癌患者血清中MDA、CK-18、CA72-4与临床病理参数关系比较 胃癌患者血清中MDA、CK-18及CA72-4水平随着TNM分期的增高而升高(P<0.01)；有淋巴结转移及肿瘤突破浆膜的胃癌患者血清中MDA、CA72-4水平明显高于没有淋巴结转移和肿瘤未突破浆膜层的胃癌患者(P<0.05)，MDA、CA72-4水平在是否有远处转移及病理分化程度之间无明显差异(P>0.05)；有远处转移的胃癌患者血清中CK-18水平较没有远处转移患者明显升高(P<0.01)；但CK-18水平在是否有淋巴结转移、是否突破浆膜层、病理分化程度之间无明显差异(P>0.05)。见表2。

表2 胃癌患者血清中MDA、CK-18、CA72-4与临床病理参数的关系

3 讨 论

随着生物分子技术的发展，目前肿瘤标志物的检测已成为诊断恶性肿瘤的重要依据。但是，现有的肿瘤标志物对胃癌的敏感性和特异性较差，在临床上容易被忽略。探索新的胃癌血清学指标和肿瘤标志物是提高胃癌诊断率的热点研究。

MDA是一系列自由基反应的最终变性产物，自由基在肿瘤的发生发展中起到重要的作用，能够引起生物膜脂质过氧化，MDA的含量可反映脂质过氧化反应的程度。本研究结果中实验组血清中MDA含量明显升高，说明胃癌患者机体内自由基活性增强，使过氧化反应增强，导致脂质过氧化物明显增多。氧自由基作用于细胞膜，使细胞膜的通透性和流动性改变，新生离子通道，引起Ca2+大量内流，破坏细胞内线粒体和溶酶，引起细胞死亡。本研究结果也显示，MDA高水平表达与胃癌的侵袭力增强、恶性程度增高有关。

CK-18为一种存在于上皮细胞分化较特异的蛋白，是细胞骨架的重要组成成分，当上皮细胞出现恶化增殖时，激活的蛋白酶会降解细胞质内的CK-18，并将降解的CK-18片段释放入血液中，引起CK-18在组织液、骨髓及尿液中含量增高；当肿瘤细胞向周围组织浸润和向远处转移时，CK-18被大量降解释放，导致血清中CK-18成倍增高。本研究结果显示，胃癌患者血清中CK-18水平升高对于判断胃癌的转移具有重要的指导意义。

CA72-4属黏蛋白类癌胚抗原，主要存在于腺癌组织中，对监测胃癌的发生、发展和观察疗效具有重要价值。在多种肿瘤标志物中，CA72-4对胃癌的特异性最高，而敏感性稍差。血清CA72-4水平与胃癌临床分期相关，CA72-4升高可在胃癌复发的临床诊断提前2～8个月或更早即可表现，是有利于早期诊断胃癌复发的重要检测手段。MDA、CK-18及CA72-4在多种肿瘤中异常表达，临床上缺乏对胃癌的特异性，但用作筛查早期胃癌时具有一定的参考意义，同时也能作为胃癌预后及术后复发的重要参考指标。

1王旭林，王红梅，牟永华，等.早期肠内营养对老年胃癌病人术后血清SOD、MDA和T细胞免疫功能的影响〔J〕.肠外与肠内营养，2012；19(2)：74-7.

2巩 涛，李 勇，范立桥，等.ω-3多不饱和脂肪酸对人胃癌BGC-823细胞PGE2、SOD和MDA的影响〔J〕.中国肿瘤临床，2006；33(19)：1102-4.

3陈炳卿，薛英本，杨艳梅，等.苯并(a)芘诱导小鼠前胃癌模型的建立及共轭亚油酸对其预防作用〔J〕.中国药理学与毒理学杂志，2002；16(5)：354-7.

4涂宏蕾，魏永长，孙海兵，等.胃癌患者血浆氧化抗氧化状态及组织8-羟基鸟嘌呤糖苷酶mRNA表达水平〔J〕.细胞与分子免疫学杂志，2011；27(7)：793-4，796.

5于颖彦，计 骏，刘炳亚，等.显微数字成像组合组织芯片技术平台的建立及其在肿瘤标志物研究中的应用〔J〕.诊断学理论与实践，2005；4(3)：188-91.

6吕 志，徐 岩，满晓辉，等.多重置换扩增结合激光捕获显微切割技术在胃癌基因组学研究中的应用〔J〕.中华实验外科杂志，2007；24(11)：1350-2

〔2017-02-08修回〕

(编辑 袁左鸣)

R73

A

1005-9202(2017)18-4584-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.071

安徽省自然科学基金项目(1708085MH213)

耿小平(1956-)，男，教授，博士生导师，主任医师，主要从事肝胆外科研究。

史加宁(1981-)，男，硕士，主治医师，主要从事普外科研究。