种鸡开产前免疫不同新城疫传染性支气管炎禽流感H9 三联油苗的效果观察

2017-06-29焦鹏涛蒋维维姬忠华何怡宁曹艳杰吴科敏侯雪娇何旭少

中国兽医杂志 2017年4期

关键词：种鸡新城疫三联

焦鹏涛，蒋维维，姬忠华，何怡宁，曹艳杰，吴科敏，陈果，刘婷，侯雪娇，何旭少，韦平

(1.广西大学养禽与禽病研究所，广西南宁530005 ； 2.广西鸿光农牧有限公司，广西容县537500)

种鸡开产前免疫不同新城疫传染性支气管炎禽流感H9 三联油苗的效果观察

焦鹏涛1，蒋维维2，姬忠华1，何怡宁1，曹艳杰1，吴科敏1，陈果1，刘婷1，侯雪娇1，何旭少2，韦平1

(1.广西大学养禽与禽病研究所，广西南宁530005 ； 2.广西鸿光农牧有限公司，广西容县537500)

为了探讨尽可能延长母鸡开产后免疫保护期的可能性，本试验选用市售的两种新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-禽流感(AI)H9三联灭活商品疫苗在广西地区主要地方品种三黄鸡的两个品系黄1和黄2上分别进行对比免疫试验。种鸡开产前的150日龄分别使用疫苗A(精制浓缩型油苗)、疫苗B (普通油苗)免疫，然后分别于免疫时以及免疫后的1个月、2个月、3个月、4个月和5个月分别使用HI试验和ELISA测定两组鸡只相应产生的血清抗体滴度。结果表明，在黄1品种上的试验，疫苗A免疫组的ND抗体水平高于疫苗B免疫组，两组鸡的H9、IB抗体水平则无明显差异；在黄2品种的试验，疫苗A免疫组的ND、H9、IB抗体水平均高于疫苗B免疫组；开产前免疫疫苗A后5个月，黄1和黄2品种均仍能维持较高的抗体水平，其中黄1品种可推迟补免时间20多天，黄2品种推迟补免时间1个月。

新城疫；传染性支气管炎；禽流感H9 ；三联油苗；血清抗体；免疫效果

新城疫(ND)是一种急性、高度接触性传染病，主要侵害鸡和火鸡，亦可感染其他禽类及人类，是禽类重要疾病之一，世界动物卫生组织将其列为A类传染病，我国亦将其列为一类动物传染病；传染性支气管炎(IB)是一种可引起鸡呼吸道、输卵管、肾脏、肠道等多个器官上皮细胞损伤，导致鸡的呼吸道、泌尿生殖系统及肠道疾病的传染病，并且容易引起细菌、支原体等的继发感染；禽流感(AI)分为高致病性和低致病性两种类型，其中H5亚型属于高致病性的A类(一类)传染病[1]，而H9亚型则属于低致病性的而且是我国当前流行的主要亚型[2]。很长一段时间以来，ND、IB和H9亚型禽流感在鸡群中的流行和危害给我国养殖业带来了巨大损失，这3种疾病是养禽业中必须预防和控制的重要疾病。

单苗分别接种(注射3次)预防往往导致免疫程序复杂、接种次数多、劳动强度大、对免疫鸡只的应激大等问题，使用新城疫-传染性支气管炎-禽流感H9三联灭活疫苗(以下简称新-支-流三联苗)能1次完成3种疫苗的免疫，收到一针预防3种疾病的效果，具有减少免疫注射次数、减少应激、省时省力省钱等优点[3]。种鸡开产前免疫油苗，不仅能使其在产蛋期间的安全得到保障，而且还能使后代雏鸡得到高而整齐的母源抗体，对于保证雏鸡的存活率具有重要意义[4-5]。目前生产上普遍在开产前免疫的是普通的新-支-流三联疫苗，由于免疫抑制病的存在等因素，疫苗产生的保护水平的免疫维持时间相对比较短，往往很难维持到产蛋高峰期。而且随着产蛋率上升，鸡体代谢旺盛，抵抗力差，就极易受到病原的侵袭[6]。生产实践中，如果开产前的免疫所产生的抗体不足以维持到产蛋高峰期过后的话，往往需要正在产蛋高峰期或者还未达到高峰期就进行补免，补免所带来的应激反应可使产蛋率受到影响，鸡群往往需要数天至1周甚至更长的时间才能使其产蛋恢复到正常水平，给种鸡的生产效益带来很大的损失。为了寻找一种在种鸡开产前免疫既可产生较高的抗体水平，又能使其保护水平的免疫力维持到产蛋高峰期过后的新-支-流三联苗，进一步了解、掌握不同新-支-流三联苗对种鸡开产前免疫的效果。笔者选用两类市售三联灭活疫苗A(精制浓缩型)和B(普通型)，在广西鸿光农牧有限公司开展了试验观察。

1 材料与方法

1.1 试验疫苗新-支-流(H9)精制浓缩三联苗A(公司A生产，批号20150324)；普通新-支-流(H9)三联苗B(公司B生产，批号20150411)。供试疫苗均在有效期内。

1.2 试验动物开产前即150 日龄三黄鸡两个品系黄1和黄2，为广西鸿光农牧有限公司种大榄鸡场笼养的父母代种鸡，饲养方式、日龄、免疫程序、试验鸡的数量等条件基本一致。

1.3 诊断试剂禽流感H9株抗原(批号20150201)和阳性血清(批号20150208)，新城疫抗原(批号20150311)和阳性血清(批号20150314)，均购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所；传染性支气管炎抗体检测试剂盒，由广西大学养禽与禽病研究所研发[7]；红细胞悬液采自非免疫鸡只，按照常规方法制备成1%悬液；生理盐水、抗凝剂、96孔V型板等自备。

1.4 试验方案试验于2015年3月～8月在广西鸿光农牧有限公司的黄1和黄2两个品系中分别进行，免疫疫苗A组、疫苗B组各6 500羽；在种鸡开产前即150 日龄，分别按常规肌肉注射免疫疫苗A组、疫苗B组(0.5 mL/只)；然后在免疫时以及免疫后的1个月(M)、2 M、3 M、4 M和5 M分别随机采血样(30份/组)进行新城疫、传染性支气管炎、禽流感H9抗体的检测。

1.5 检测方法新城疫和禽流感H9的血清抗体，按照《中国兽药典》方法和试行规程进行[8]；传染性支气管炎的血清抗体，按照广西大学养禽与禽病研究所建立的间接N-ELISA方法[7]进行检测，统计组内平均值，分析组间差异。

1.6 数据统计分析数据用生物学统计软件SPSS21.0进行统计分析。

2 结果与分析

两个品系鸡上进行的试验及其3种病原的特异性抗体产生情况见表1。

表1 两种品系鸡免疫两种疫苗后ND、IB、H9抗体效价检测结果 log2/OD值

注：同一列肩标不同小写字母之间的数据差异显著(P<0.01或P<0.05)，不同大写字母的数据之间差异极显著(P<0.01)，未标字母表示差异不显著(P>0.05)

2.1 黄1品种抗体水平及消长规律黄1品种鸡免疫两组疫苗后，ND抗体水平两组都是先下降，后上升，免疫后4 M、5 M两组抗体水平差异极显著(P<0.01)；而H9抗体水平两组都是先上升后下降，差异不显著(P>0.05)(图1)；IB抗体水平两组的消长规律都是免疫三联疫苗后抗体水平先下降，1 M后开始上升，3 M后达到高峰，免疫后5 M两组抗体均下降，水平基本一致(P>0.05)(图2)。

图1 黄1品种ND、H9抗体水平消长规律图2 黄1品种IB抗体水平消长规律

2.2 黄2品种抗体水平变化及消长规律黄2品种鸡免疫后的ND抗体水平，两组均在免疫后升高，免疫后1 M达到峰值，然后开始下降，2 M后又开始上升，免疫后4 M恢复到较高水平，免疫后5 M又下降到较低水平，其中免疫后4 M、5 M两组抗体水平差异极显著(P<0.01)；H9抗体水平两组在免疫后均整体升高，免疫A组在2 M后有所下降，免疫B组升高，两组在免疫3 M后开始下降，其中免疫后5 M两组抗体水平差异极显著(P<0.01)(图3)。IB抗体水平两组在免疫后均先升高后下降，免疫后4 M恢复至较高的水平，免疫后5 M又下降到较低水平，其中免疫后1 M、3 M两组抗体水平差异极显著(P<0.01)，免疫后5 M两组抗体水平差异显著(P<0.05)，而且整体来看免疫A组稳定性优于免疫B组(图4)。

图3 黄2品种ND、H9抗体水平消长规律图4 黄2品种IB抗体水平消长规律

3 讨论

新-支-流精制三联苗A在黄2品种试验中ND、H9、IB抗体水平均优于普通三联疫苗B，在黄1品种试验中ND抗体水平优于普通三联疫苗B，H9、IB抗体水平无明显差异。免疫新-支-流精制三联苗产生抗体滴度的离散度在两个品种中均小于免疫普通三联油苗。

总结长期生产实践的经验是把ND≥7 log2、H9≥8 log2作为种鸡群的临床发病保护水平，当抽检样本有20%的个体低于保护率水平时，需要对种鸡群进行补免[9-11]。根据试验的具体情况及其多年来的生产经验，为了使鸡群能抵抗外界强毒的攻击，对于产蛋前免疫普通三联苗的鸡群，一般在免疫后的100～106 d进行一次补免(虽然此时抗体水平处于临界值以上)。

而本次试验中，根据抗体检测的结果，黄1品种鸡群在免疫新-支-流精制三联苗后一直持续到129 d才对鸡群进行了补免，补免时间推迟了20多天；黄2品种在免疫新-支-流精制三联苗后一直持续到136 d才需要进行补免，比免疫普通三联苗推迟补免时间长达30多天之久。这样免疫新-支-流精制三联苗可有效的避免了种鸡产蛋高峰期前后进行疫苗补免可能对鸡群造成的应激大、产蛋量下降、鸡蛋品种差等不利影响。

不同厂家生产的疫苗在实际生产中，免疫效果受多种因素的影响，免疫接种时不仅要根据养殖场的实际情况，还要及时对鸡群抗体水平进行检测，适时抽检，制定合理的免疫方案，减少损失。

[1] 蔡弋，亓文宝，徐成刚，等.种鸡禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫程序的研究[J].中国兽医杂志，2009，45(7):14-16.

[2] 毕英佐.H9N2亚型禽流感的流行现状和防制措施[J].中国家禽，2009，31(11):33-34.

[3] 吴清民，陈福勇，张中直，等.鸡4种病毒抗原液的浓缩及其四联油佐剂灭活苗的研制[J].中国兽医杂志，2001，37(1):9-12.[4] 姚远，张帆，郗正林，等.蛋雏鸡新城疫母源抗体消长规律的分析[J].家禽科学，2013(1):41-43.

[5] 雷红宇，胡仕凤，宁玲忠，等.雏鸡禽流感母源抗体的消长规律及其免疫效果[J].畜牧兽医杂志，2008，27(2):6-7.

[6] 杨淑晶，王艳丽，郭贯伟.蛋鸡开产前后的饲养管理[J].中国禽业导刊，2008，25(5):37-38.

[7] 李孟，姜佳佳，何坤，等.应用建立的间接N-ELISA方法检测临床不同血清样品IB抗体的比较及分析[J].广西畜牧兽医，2012，28(4):195-197.

[8] 中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典[S].北京：中国农业出版社，2005.

[9] 张成仲.一起蛋鸡禽流感H9的诊断分析[J].山东畜牧兽医，2015，36(6):74-75.

[10] 贾松涛，刘星，刘炜，等.不同免疫程序ND抗体消长规律及免疫保护临界值的测定[J].中国动物检疫，2010，27(9):51-52.[11] 胡北侠，黄艳艳，路希山，等.规模化肉种鸡场新城疫和禽流感带毒监测与抗体检测研究[J].中国畜牧兽医，2009，36(6):131-133.

2016-04-28

国家现代农业产业技术体系广西肉鸡产业创新团队建设项目(nycytxgxcxtd-04-20-2)；广西重大科研项目(桂科重14121003-4-1)